袁文清
（湖北省大冶市人民医院消化内科；湖北大冶435100）
摘 要 目的：研究黄石地区幽门螺杆菌(H．pylori，Hp)对克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑、呋喃唑酮、左氧氟沙星和四环素的耐药状况。方法：选取黄石地区因上消化道症状而接受胃镜活检标本187例，进行Hp培养、分离，应用E—test法进行克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑、呋喃唑酮、左氧氟沙星和四环素的药敏试验。结果：克拉霉素的耐药率为28．2％(27／85)，阿莫西林的耐药率为9.4％(8／85)，甲硝唑的耐药率为88．2％(75／85)，呋喃唑酮的耐药率12.9％(11／85) ，左氧氟沙星的耐药率为10．5％(9／85)，四环素的耐药率0％，甲硝唑和克拉霉素的同时耐药率为17．6％(15／85)。结论 黄石地区幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药率(89．5％)高，对克拉霉素、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐药(28．2％、14.1％、10．5％)有一定的比例，对阿莫西林的耐药菌株(9.4％)也已出现，未出现对四环素耐药株.
【关键词】幽门螺杆菌 耐药
[Abstract]: Objective:To study the resistance of H. pylori to clarithromycin, amoxicillin, metronidazole, furazolidone, levofloxacin, and tetracycline in Huangshi area. Methods: 187 cases of gastroscopy biopsy specimens were selected from the Huangshi area due to upper gastrointestinal symptoms. Hp culture and isolation were conducted, the E-test method was applied for clarithromycin, amoxicillin, metronidazole, furazolidone, levofloxacin, and tetracycline sensitivity test. Results: The drug resistance rate of clarithromycin was 28.2% (27/85), the drug resistance rate of amoxicillin was 9.4% (8/85), the drug resistance rate of metronidazole was 88.2% (75 /85), the drug resistance rate of furazolidone was 12.9% (11/85), the drug resistance rate of levofloxacin was 10.5% (9/85), the drug resistance rate of tetracycline was 0%, the drug resistance rate of metronidazole and clarithromycin was 17.6% (15/85). Conclusion: the resistance rate of Helicobacter pylori to metronidazole (89.5%) in Huangshi area is high, and the resistance to clarithromycin, furazolidone and levofloxacin (28.2%, 14.1%, 10.5%) has a certain proportion, the resistant strains to amoxicillin (9.4%) have also appeared, but there is no resistant strain to tetracycline.
[Key words]: Helicobacter pylori drug resistance
幽门螺杆菌(helicobacter pylori，Hp)感染与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌等主要上消化道疾病的发病密切相关[1]。根除Hp不仅可促进溃疡愈合，而且能降低复发，提高溃疡的愈合率。Hp治疗最大的难题是其对抗生素的耐药，这是导致Hp根除失败的主要原因[2]。随着根除治疗的普遍开展，Hp的耐药率呈上升趋势，是PPI三联根除治疗失败的重要原因之一。鉴于全国各地应用抗生素品种等情况的不同，各地幽门螺杆菌的耐药状况也不同，因此，对当地幽门螺杆菌耐药状况的监测，对于指导临床选择敏感的抗菌药非常重要。本研究通过监测黄石地区患者感染Hp后对克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑、呋喃唑酮、四环素和左氧氟沙星的耐药状况，以制定适合黄石地区根治Hp的治疗方案。
1 对象与方法
1．1 对象 85株临床分离的Hp菌株均来自黄石地区2012年6月至2013年6月在本院接受胃镜检查的187例患者，其中男性患者分离出39株，女性患者分离出46株，平均年龄43.6岁(16—84岁)
1．2 方法
1．2．1 标本采集 用无菌活检钳于胃窦部距幽门3cm内取胃黏膜组织l块，做快速尿素酶试验，阳性者再于该处取组织2块，用于Hp培养。用无菌牙签将组织置于装有少量保存液的无菌离心管中。
1．2．2 菌株分离 采用匀浆接种，置于37。C微需氧环境中培养，用抽气、换气法，在培养5-7d后观察分离效果，菌株鉴定阳性者进行传代增菌。
1．2．3 菌株鉴定 通过涂片观察菌落形态，革兰染色以及尿素酶试验进行菌株鉴定。
1．2．4 药敏试验 采用E—test药敏试纸对培养出的Hp行克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑、呋喃唑酮、左氧氟沙星和四环素等敏感性试验。根据厂家说明读取细菌的最低抑菌浓度值(MIc)。结果判定标准：阿莫西林(AC)>2mg／L，克拉霉素(CH)>2mg／L，甲硝唑(MZ)>8mg／L，左氧氟沙星(lx)>5mg／L, 呋喃唑酮(fz)
>3mg／L, 四环素(rx)>4mg／L为耐药。
1.2．5 统计学方法 实验数据采用SPSS 13.0进行统计学处理，率的比较采用x2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 Hp培养结果 187例标本共有85例Hp培养阳性，其阳性率为45.4％(85／187)，其中男性患者Hp培养阳性率为42.3％ (39／92)，女性为48.4％(46／95)，男女相比差异无显著性(p>O．05)。
2.2 Hp耐药状况 在Hp培养阳性的85例标本中，克拉霉素的耐药率为28．2％(27／85)，阿莫西林的耐药率为9.4％(8／85)，甲硝唑的耐药率为88．2％(75／85)，呋喃唑酮的耐药率12.9％(11／85)，左氧氟沙星的耐药率为10．5％(9／85)，四环素的耐药率0％，甲硝唑和克拉霉素的同时耐药率为17．6％(15／85))，甲硝唑的耐药率明显高于其它药物(甲硝唑与克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮、四环素和左氧氟沙星比较，其x2值分别为59.88，104.61，23.44，49.71，30.05，p均<O．05), 克拉霉素的耐药率明显高于除甲硝唑外的其它药物(克拉霉素与阿莫西林、呋喃唑酮、左氧氟沙星和四环素比较，其x2值分别为11.87，4.90，22.10，8.58，p均<O．05)。阿莫西林与呋喃唑酮的耐药率比较，其x2值为1.84，p＞O．05，差异无显著性；左氧氟沙星与呋喃唑酮的耐药率比较，其x2值为0.59，p＞O．05，差异无显著性；阿莫西林与左氧氟沙星的耐药率比较，其x2值为0.36，p＞O．05，差异无显著性。见表1。
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3 讨论
随着抗生素的广泛应用，病原微生物包括Hp的耐药现象日趋严重[3]。Hp对抗生素耐药的问题在全球均比较普遍。在国内，不同地区的Hp对抗生素的耐药性不同，北京、上海、温州等地区[4]Hp耐药性的研究显示：甲硝唑耐药率最高，其次为克拉霉素，阿莫西林耐药率较低，但亦出现耐药现象。监测各地不同时间Hp的耐药情况对调整Hp的根治方案是必要的。
本研究结果显示，湖北黄石地区Hp对克拉霉素的耐药率为28．2％(27／85)，阿莫西林的耐药率为9.4％(8／85)，甲硝唑的耐药率为88．2％(75／85)，呋喃唑酮的耐药率12.9％(11／85)，左氧氟沙星的耐药率为10．5％(9／85)，四环素的耐药率0％，甲硝唑和克拉霉素的同时耐药率为17．6％(15／85)， Hp对抗生素产生耐药性是关系到Hp能否被根除的关健问题。甲硝唑价格便宜，在胃内具有高稳定性和高活性，多年来一直被作为Hp根除治疗的主要药物之一。妇科和口腔疾病的治疗中甲硝唑也被广泛应用，可能是导致Hp对甲硝唑耐药率迅速增加的原因之一。克拉霉素被认为是Hp根除治疗方案中最有效的抗生素，近来克拉霉素不但被用于Hp的根除治疗，在其它染性疾病中也被广泛应用，从而导致Hp对克拉霉素的耐药率增加；此外，其他大环内酯类药物如红霉素、阿奇霉素等与克拉霉素存在交叉耐药，前者的广泛应用也是导致Hp对克拉霉素耐药的原因之一。阿莫西林在临床应用非常广泛，我们的研究显示其耐药率9.4％，Hp对阿莫西林的耐药率较低，可能与Hp对阿莫西林耐药的特殊机制有关。左氧氟沙星目前部分病人已出现耐药。Hp对四环素未出现耐药，且价格低廉，是补救治疗中比较理想的药物，但需监测其副作用。
本研究结果显示，黄石地区Hp对甲硝唑的耐药率很高，对克拉霉素、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐药有一定的比例，对阿莫西林的耐药菌株也已出现，未见对四环素耐药。提示在本地区根除Hp治疗中不推荐使用甲硝唑，而应大力推广含阿莫西林、左氧氟沙星及呋喃唑酮、四环素的根治Hp方案。应持之以恒地进行Hp耐药的监测并及时报告结果，以便合理、规范应用抗生素，根据药敏结果选用高效的根除方案，科学指导Hp的根除治疗，使本地区Hp的根除上升到一个新的水平。
参考文献
1 NIH Consensus Development Panel on Helicobacter pylori in Peptic Ulcer Disease． JAMA，1994，272(1)：65·69．
2 成虹,伏莲，李江．幽门螺杆菌耐药性对其根除治疗的影响．中华医学杂志，2006，86(38)：2679．2682．
3 McMahon B J，Hennessy T W ，Bensler J M ，et a1．The relationship among previous antimicrobial use，antimicrobial resistance，and treatment outcomes for Helicobacter pylori infections[J]Ann Intern Med，2003，139：463-469．
4Perez Aldana L，Kato M ，Nakagawa S，et a1．The relationship between consumption of antimicrobial agents and the prevalence of primary Helicobacter pyloriresistanceIJ]．Helicobacter，2002，7：306-309．