[摘要]目的：探究灯盏细辛胶囊对心肌梗死后患者mi-RNA的影响。方法：纳入2017年12月-2018年12月收治的心肌梗死患者共60例，随机分为两组:常规治疗+灯盏细辛胶囊组和常规治疗组。同时，招募健康志愿者30例，比较上述三组人群的基本资料，抽取三组患者治疗前、治疗后3个月、治疗后 6个月的空腹静脉血5mL，提取血浆总RNA，对差异microRNA进行生物学分析。结果：32种miRNA表达水平较正常对照组相比出现显著性变化(P<0.05)，其中上调的miRNA有20种，下调的miRNA有12种；治疗后，上调的20种miRNA呈下降趋势，且常规治疗+灯盏细辛胶囊组下降更为明显，差异有统计学意义（P<0.05）；下调的12种miRNA呈上升趋势，且常规治疗+灯盏细辛胶囊组上升更为明显，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：急性心肌梗死能引起患者miRNA改变，常规治疗+灯盏细辛胶囊和常规治疗均能通过改变miRNA而调节患者的生理状态
随着目前医学分子学的高速发展，非编码miRNA在心血管类疾病的发病以及诊断中的重要作用已经引起临床工作者高度关注，鉴于目前临床上对AMI后患者的血管内皮功能以及发病过程中miRNA的表达水平变化尚不明确[1]，所以本文旨在研究灯盏细辛胶囊对心肌梗死患者的miRNA表达水平的影响，评估灯盏细辛胶囊对心肌梗死病人的治疗效果。
1.对象与方法
1.1 研究对象
从我院自2016年12月到2018年12月接受治疗的病例中筛选出60例心肌梗死患者，按照随机分配的原则划分为两组：常规治疗+灯盏细辛胶囊组和常规治疗组。此外，根据实验原则，我们还招募了30例健康志愿者。
1.2 研究方法
抽取AMI患者血浆和与之相互照应的正常血浆样本，利用荧光定量PCR检测miRNA芯片所得三十六种差异表达的miRNA的表达情况。
本试验由上海伯豪生物技术有限公司提供技术平台。所用仪器芯片及试剂为美国AGILENT公司生产。采用mirVanamirVanaTM PARISTM(专用于抽提血的 microRNA)，根据生产厂商提供的标准操作流程进行样品的Total RNA抽提，经质检合格后备用。进行样品的第一链cDNA合成、第二链cDNA合成、IVT扩增、标记、去磷酸化、变性、连接、片段化、芯片杂交、洗涤和扫描。
1.3 统计分析
利用microRNA获得的原始数据用归一化后， 采用Fold-change以及t检验统计学方法对差异基因进行筛选，（1）FC≥2;（2）T-test，P<0.05。
2 结果
在三十六种miRNA中，表达水平显著提高的miRNA有miR-134-5p，miR-16-5p，miR-208-3p，miR-133-5p，miR-124-3p，miR-147b，miR-542-5p，miR-31-5p，miR-34a-5p，miR-143-3p，miR-328-5p，miR-101-3p, miR-663b，miR-1291，miR-126-3p，miR-208b-3p，miR-21-5p，miR-27a-3p，miR-150-3p，miR-486-3p (P<0.05)；表达水平有所降低的miRNA有miR-26a-5p，miR-133-3p，miR-423-5p，miR-106a-5p，miR-499-5p，miR-26b-3p，miR-191-5p，miR-17-5p，miR-18a-5p，miR-487b-3p，let-7d-5p，miR.519e-5p(P<0.05)。有4种miRNA在AMI组中的表达水平与正常对照组的表达水平相比没有明显差异(P>0.05)，包括miR-361-5p，miR-182-5p，miR-497-5p，miR-20a-5p。相关结果如下图所示:
3 讨论
众多miRNA在各种心血管疾病中都有作用。人类间叶细胞干细胞(MSCs)中表达过度的miR133a。该RNA能够通过影响靶基因生长因子受体的表达水平来影响心脏发生分化，miR-499还能够利用细胞间的间隙连接从已表现为分化的心肌细胞迁移到CPCs，促进后者演化为高效分化心肌细胞[2]。
本研究证实在AMI患者体内外周血循环血液中，总体来说会出现三十二种miRNA合成表达水平异常；其中存在二十种miRNA合成表达显著增加，十二种miRNA合成表达显著降低。
根据最新一项研究表明，miR17～92，特别是miR-19和miR-19b能够使得心肌细胞增生能力提高，还能够有效地保护心脏组织防止出现AMI后的血供不足损[3]。去除了miR1-2基因的小鼠相应的会发生心电图的改变，主要表现在低心率，PR间期缩短，QRS波增宽等。
患者经常会由于心律不齐异常而死亡，这个事实说明了miRNA也会影响心律失常，根据相关研究预测，miR-24可能通过下调凋亡前蛋白Bim的表达水平来阻止心肌细胞凋亡；在小鼠心肌梗死的模型中，小鼠体内miR-24高表达也会抑制心肌细胞不正常凋亡，进一步缩小心肌缺血范围，改善心脏功能[4]。
参考文献：
[1] 裴颖皓.miRNA在急性心肌梗死诊断中的研究进展[J].医学综述,2014,20(4):616-618.
[2] 许啸. miRNA-210在人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化中的作用及意义[D]. 第四军医大学, 2010.
[3] 王韵茹, 李勇, 厉传艺, 等. 小鼠心脏成纤维细胞直接转分化为心脏祖细胞的实验研究[J]. 徐州医学院学报, 2015(7):421-426.
[4] 王珏, 黄伟聪, 郑亮承,等. MicroRNA-24对心肌梗死后心肌细胞凋亡的调控作用[J]. 中国病理生理杂志(4):18-24.
作者简介：张超，男，1984.2，本科，青岛大学医学部，潍坊滨海经济技术开发区人民医院。
通讯作者：安毅，男，1965年生人，青岛大学附属医院主任医师，教授，博士研究生导师，青岛大学附属医院西海岸院区心内科主任，青岛市高血压病重点实验室主任，青岛市政府特殊津贴专家。