核酸检测的注意事项

发表时间:2019/6/27   来源:《中国保健营养》2019年第2期   作者:蔡华英
[导读] 自2015年以来,核酸检测已在全国各范围血站内大量开展,以提高经血传播传染病的检出率,保证临床安全用血。但核酸检测技术影响因素多,也有可能导致漏检情况,输血中的安全性不能被保障,我站自2016年开始运用核酸检测技术进行血液筛查,经过几年的实践,积累了一些经验,本文就核酸检测应注意的问题分享以下几点:
(自贡市中心血站  四川自贡 643000
【中图分类号】 R197     【文献标识码】A      【文章编号】1004-7484201902-0059-01

2015年以来,核酸检测已在全国各范围血站内大量开展,以提高经血传播传染病的检出率,保证临床安全用血。但核酸检测技术影响因素多,也有可能导致漏检情况,输血中的安全性不能被保障,我站自2016年开始运用核酸检测技术进行血液筛查,经过几年的实践,积累了一些经验,本文就核酸检测应注意的问题分享以下几点:
1 样本问题
样本因素是影响核酸检测的重要因素,它对使用的真空管、抗凝剂、保存运输条件、离心条件、检测时限等都有明确规定。用于血液采集的真空管一定是无抑制物、密封性好的试管,里面的抗凝剂通常选用EDTA,避免使用肝素,使用前应进行质检,合格后方可投入使用;采集血液的时候还应注意防止污染,需对采集部位进行清洁消毒,采集适合的血液量,充分混匀血液;采集的血液应在4h内离心,尽快地送到实验室,当核酸样本从采血点运送到实验室的过程中,必须借助冷藏运输箱来进行运输,严格控制运输温度,特别是夏季的时候,高温天气可能会导致试管里的分离胶变性、靶核酸失活等影响核酸检测结果;送到实验室的标本应尽快进行检测,要考虑到拆分或鉴别实验的时限,不能检测的标本应在-20以下冻存。

2 试剂问题
实验室使用的试剂质量对测定结果的影响是直接而又极为关键的,不仅每一批试剂盒都要进行质检,就算是同一批、不同的进货批次也要进行质检,因为不同的运输条件对试剂盒质量也要产生影响,质检的时候还应注意不能只做一批次检测就认为合格,应多做几批次比较,因为核酸检测的影响因素多,一次检测往往不能发现系统误差问题,多做几次对判断试剂的质量及其稳定性具有重要的参考价值;试剂盒要在适当的温度下储存,严格按照试剂说明书使用,不同批号的试剂严禁混用,。
3 设备问题
核酸实验室所使用的设备最主要的就是核酸提取设备和扩增设备:核酸提取设备的提取效果是能否检测到靶核酸的先决条件,核酸扩增设备对核酸检测结果有直接的影响,因此,应高度重视对设备的使用、维护。操作人员需要定期维护、厂家定期校准,使其能处于一个良好的状态,不使用时对仪器进行外罩,在开展试验的过程中,实验室的温湿度需被合理的调整,当夏季来临时,空调应该提前打开,室内的温度与湿度被合理的调节,温度不能超过25摄氏度,湿度不应该大于70%,否则仪器运行中可能会出现问题。实验使用的加样器、离心机等设备也应定期维护和校准,保证有足够的准确度和精密度。维护中应遵循系统的原则,每经过一段时期,对软件进行系统性的检查,运用无纺布来擦拭设备,防止一些纤维丝落入到器械内部中。
4 防污染问题
实验室环境中的污染物主要来源于标本中存在的大量待测微生物或以前扩增产物的残留污染,容易造成假阳性的污染。在工作中应严格分区及严格遵守工作程序,勤换手套、工作服,防止交叉污染,及时清理垃圾,做好实验室的清洁消毒。样本提取完后扩增前,注意要盖紧扩增反应管,防止扩增的时候温度过高,反应管中液体泄漏,扩增产物分子污染实验室,同时,要注意实验室通风,非工作人员严禁无序和随意进入实验室。
5 人员问题
工作人员在整个实验过程中起着至关重要的作用,再好的设备、试剂、环境只有工作人员正确地操作、维护,才能得到保证检测结果的准确性,因此,应注意对工作人员的培训,使每个工作人员严格遵循管理制度及按照标准规程做事。
综上所述,影响核酸检测的影响因素多,应从多方面加强防范,注意样本、设备、试剂、环境等因素对结果的影响,避免差错发生。

 
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