大肠埃希菌的微生物检验方法与临床分析

发表时间:2019/5/15   来源:《中国结合医学杂志》2019年3期   作者:唐友凤
[导读] 结论:临床上在检验大肠埃希菌时,按照《中国药典》2015年版中的相关要求,能够使准确性提高。

湖南省慈利县疾病预防控制中心  湖南张家界  427200
        【摘  要】目的:探讨大肠埃希菌的微生物检验方法与临床价值。方法:选择某院2017年12月-2018年12月期间送来的检验标本51例为研究对象,按照《中国药典》中的相关要求检验大肠埃希菌,并且分析检验结果。结果:在本次研究中,共检出31例大肠埃希菌菌落,检出率为60.78%(31/51);同时,大肠埃希菌在MacA平板上的形态学表现为:①表面光滑、湿润,且边缘整齐;②形状比较扁平,主要为圆形;③菌落颜色主要为鲜桃红色,大多数菌落中心为深桃红色,但是一些为微红色。结论:临床上在检验大肠埃希菌时,按照《中国药典》2015年版中的相关要求,能够使准确性提高。
        【关键词】《中国药典》;微生物检验;大肠埃希菌
       
       
在人体肠道菌群中,大肠埃希菌是比较重要的一个组成部分,具有复杂的发病机制,一般为人体的抵抗力和免疫力降低后,使大肠埃希菌的寄居条件发生了改变,从而诱发机会感染或二重感染,临床上多见于肠道感染、败血症以及伤口感染等[1]。有研究发现,通过对大肠埃希菌进行微生物检验,能够明确判断患者病情,在一定程度上有助于临床方案的制定。
        因此,本文对大肠埃希菌的微生物检验方法与临床效果进行了探讨,现报道如下。
        1.资料和方法
        1.1一般资料
        选择2017年12月-2018年12月期间某院送来的51例检验标本为研究对象,并且选择[CMCC(B)44102]大肠埃希菌,提供者为中国食品药品检定研究院。
        1.2方法
        1.2.1试剂和仪器
        本次研究仪器包括CP-ST200电热恒温培养箱、VITEK2全自动微生物分析仪;而试剂则包括以下3种:①TSB。胰蛋白胨大豆汤培养基100ml;②MacA。麦康凯琼脂培养基;③MacB。麦康凯肉汤培养基。
        1.2.2方法
        对大肠埃希菌进行微生物检验时,根据《中国药典》2015年版的相关要求进行,操作如下:在无菌操作台上,在TSB培养基中接种10ml样品供试液,在另一TSB培养基中接种pH=7.0的10ml氯化钠蛋白胨缓冲液,将其作为阴性对照组。然后在第3个TSB培养基中接种供试液10ml,再加入大肠埃希菌菌悬液,并将其作为阳性对照组。同时,将3个培养基分别放入恒温箱中培养,掌握好时间,一般为18h,再在MacB培养基中接种1ml培养物,并且在恒温条件下培养24h。最后,再运用接种环对培养物进行沾取,在MacA平板上接种,然后在33°C恒温条件下进行18h倒置培养。
        1.3观察指标
        分别检查平板内的菌落类别,如果没有出现菌落或生长菌落鉴定结果为阴性,则说明没有发现大肠埃希菌;如果发现菌落生长,且经鉴定后显示为阳性,则提示检出大肠埃希菌。
        2.结果
        2.1检验效果
        本次研究的51例样品中,共检出大肠埃希菌菌落31例,占60.78%,其中阳性对照组可见大肠埃希菌生长,并且具有较好的纯度;而阴性对照组则没有出现菌落生长。



        2.2大肠埃希菌的表现形态
        大肠埃希菌在MacA平板上的形态学表现为:①表面光滑、湿润,且边缘整齐;②形状比较扁平,主要为圆形;③菌落颜色主要为鲜桃红色,大多数菌落中心为深桃红色,但是一些为微红色。
        3.讨论
        3.1大肠埃希菌的主要特征
        3.1.1形态特征
        根据大肠埃希菌的大小可以将其分为3种类型:①染色菌。1.0-3.0&mu.m;②干菌。0.40-0.70&mu.m;③活菌。2.0-6.0&mu.m或者1.1-4.8&mu.m。同时,大部分大肠埃希菌有周身鞭毛,可以运动,无芽孢,周身还有菌毛,一些菌株存在胞膜,且主要为单个存在,少部分成对。
        3.1.2培养特征
        大肠埃希菌的最适宜pH值为7.4-7.6,生长温度为37°C,在普通培养液上可以良好生长,形成直径2-3cm,且湿润、圆形、半透明、光滑、灰白色、整齐边缘且凸起的菌落。但是有研究发现,在不同培养平板上,其表现也存在着一定的区别:①SS琼脂平板。大部分被抑制,生长菌落呈现出红色,且均匀生长在营养肉汤内;②伊红-亚甲蓝琼脂平板。菌落呈现出蓝紫色,但是在中国蓝琼脂平板上则表现为蓝色;③血琼脂平板。一些菌株可出现&beta-溶血环。
        3.2大肠埃希菌的微生物检验价值
        近年来,随着抗生素在临床上的广泛运用,感染性病原菌也随之出现变异,增加了耐药情况,在一定程度上增加了感染性菌株的临床诊断和治疗难度。有研究发现,在呼吸系统、泌尿系统等出现细菌感染的部位,大部分可以分离出大肠埃希菌,如果控制不及时,容易出现超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),从而诱发院内感染[2]。临床上在对大肠埃希菌进行检验时,通常以微生物检验为主,其准确性较高,并且临床医生根据微生物检验结果,选择合适的治疗药物,能够避免抗生素滥用,从而确保治疗效果[3]。在本次研究中,首次预增菌在TSB培养基上进行,再在42°C条件下运用MacB平板培养培养物,然后接种在MacA平板上,不仅能够使受伤菌株的复壮培养效果增强,还能将处于休眠期或半休眠期的大肠埃希菌检出,增加大肠埃希菌的检出率,从而提高检验准确度 [4]。本次研究结果显示,51例样品中,共检出大肠埃希菌菌落31例,占60.78%,其中阳性对照组可见大肠埃希菌生长,并且具有较好的纯度;而阴性对照组则没有出现菌落生长,这一结果与王春玲[5]等研究报道一致。
        综上所述,根据《中国药典》中的相关规定,对大肠埃希菌进行微生物检验,一方面可以提高大肠埃希菌的检出率,另一方面还能准确判断患者病情,为制定针对性治疗方案提供有效依据,值得推广。
        参考文献:
        [1]林高平,肖勍,邹立新.大肠埃希菌的微生物检验方法及临床意义[J].基层医学论坛,2017,21(11):1369-1370.
        [2]郑卫东,陈萍,田彩霞.1124株中段尿分离病原微生物耐药性监测结果[J].中国抗生素杂志,2012,37(02):158-162.
        [3]陆春光.大肠埃希菌的微生物检验分析[J].心理医生,2015,21(16):235-236.
        [4]孙胜平.王群林.关于发用类化妆品微生物检验方法适用性探究[J].大家健康(下旬刊),2016,10(4):84.
        [5]王春玲.张圣颖.大肠埃希菌的微生物检验分析[J].医药前沿,2016,6(14):376-377.
       

 

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