高效液相色谱法测定阿齐沙坦片的含量

发表时间:2019/4/9   来源:《医师在线》2018年23期   作者:范学杠
[导读] 结论 该方法简便、准确、专属性好,可适用于阿齐沙坦片含量的测定。

(海南欣莱医药科技股份有限公司,海南  海口  570311)
        【摘要】目的 建立高效液相色谱法测定阿齐沙坦片的含量。方法 色谱柱为Luna C18(250×4.6mm,5μm);以水(用磷酸调pH至3.00)-乙腈(55:45)为流动相;柱温为30℃;检测波长为210nm;流速为1.0ml/min。结果 阿齐沙坦浓度在40~60μg/ml的范围内与峰面积呈良好的线性关系;含量精密度为99.9%(n=12),RSD为0.11%;对照品溶液及供试品溶液在室温条件下放24小时,溶液峰面积RSD均在0.5%以内;回收率平均值为100.5%(n=9),RSD%为0.37%,回收率良好。结论 该方法简便、准确、专属性好,可适用于阿齐沙坦片含量的测定。
        【关键词】高效液相色谱法;阿齐沙坦片;含量测定
        [ 中图分类号 ]R2    [ 文献标号 ]A    [ 文章编号 ]2095-7165(2018)23-0300-02
       
       
阿齐沙坦(又称阿齐沙坦酯,Azilsartan)是治疗高血压症的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂药物,选择性阻断血管紧张Ⅱ与AT1受体结合,以从阻断血管紧张Ⅱ引起的血管收缩,醛固酮分泌等升血压效应。其作用不依赖于血管紧张素Ⅱ合成途径,避免了ACEI对缓激肽水平的影响,几乎没有干咳等副作用。阻断血管紧张素Ⅱ受体可抵制血管紧张素Ⅱ对肾素分泌的负反馈调节[1]。阿齐沙坦由日本武田公司研发,于2012年1月在日本获准上市,其片剂商品名为Azilva[2]。
        按中国药典以及相关文献[3-8],建立了高效液相色谱法测定阿齐沙坦片含量的方法,测得结果准确可靠,可用于阿齐沙坦片的含量测定。
        1 仪器和材料
        1.1仪器
        高效液相色谱仪(岛津公司)、十万分之一电子天平(赛多利斯)、酸度计(赛多利斯)
        1.2药品及试剂
        阿齐沙坦对照品(厂家:TLC;规格:100mg/支;批号:1292-080A1;含量:98.3%);阿齐沙坦片(公司自制,批号:20180301、20180302、20180303);磷酸为分析纯;乙腈为色谱纯;水为超纯水。
        1.3色谱条件
        色谱柱:Luna C18(250×4.6mm,5μm)(菲罗门)
        流动相:水(用磷酸调pH值至3.0)-乙腈(55:45)
        流速:1.0ml/min;检测波长:210nm;柱温:30℃;
        进样量:10μl
        1.4溶液配制
        对照品溶液:精密称取阿齐沙坦对照品约10mg,精密称定,置200ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
        供试品溶液:称取本品细粉适量(约相当于阿齐沙坦10mg),精密称定,置于200ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,过滤,取续滤液。
        2 方法及结果
        2.1专属性试验
        本品在酸(0.5mol/ml的盐酸溶液,60℃水浴5min)、碱(0.5mol/ml的氢氧化钠溶液,100℃水浴1h)、氧化(30%的过氧化氢溶液,60℃水浴30min)、高温(150℃高温放置2h)、光照(4500lx±500lx照度放置48h)等条件下进行破坏试验,结果表明,主成份峰的峰纯度均大于0.999,破坏降解的杂质峰与主成份峰分离度符合规定,本法的专属性良好。
        2.2线性关系试验
        取阿齐沙坦对照品适量,加甲醇溶解并稀释制成每1ml含阿齐沙坦浓度约为40μg、45μg、50μg、55μg、60μg的溶液,作为线性系列溶液,分别精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图。以峰面积(A)为纵坐标、浓度(μg/ml)为横坐标进行线性回归方程分析,阿齐沙坦对照品在浓度为40μg~60μg/ml范围内,直线方程为y=72183834x-119323,r=1.0000,线性关系良好。
        2.3精密度试验
        2.3.1进样精密度试验
        取上述“1.4”对照品溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,连续进样6次。连续进6针的峰面积RSD为0.24%,保留时间的RSD为0.06%,说明进样精密度良好。
        2.3.2重复性试验
        按上述“1.4”方法制备供试品溶液及对照品溶液,平行制备6份,精密量取10μl,注入液相色谱仪,阿齐沙坦片含量重复性结果为99.9%,RSD为0.41%,重复性良好。
        2.3.3中间精密度试验
        在相同的试验室由不同人员、不同的仪器及不同的时间进行试验,按上述“1.4”方法制备供试品溶液及对照品溶液,平行制备6份,阿齐沙坦片含量重复性结果为100.0%(n=6),RSD为0.15%,重复性良好。
        阿齐沙坦片含量中间精密度试验结果为99.9%(n=12),RSD为0.11%,中间精密度良好。
        2.4溶液稳定性试验
        按上述“1.4”方法制备供试品溶液及对照品溶液,室温条件下放置0h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h,分别精密量取10μl,注入液相色谱仪。在室温条件下放置24小时内,阿齐沙坦对照品溶液峰面积RSD为0.20%,阿齐沙坦供试品溶液峰面积RSD为0.28%,说明上述溶液稳定性均能满足含量测定要求。
        2.5准确度试验
        按处方比例取混合空白辅料及适量的阿齐沙坦对照品,制备溶液浓度含阿齐沙坦为80%、100%、120%的供试品溶液,每个浓度制备3份,精密取上述溶液各10μl,注入液相色谱仪,记录色谱图。阿齐沙坦的平均回收率为100.5%(n=9),RSD为0.37%,回收率良好。
        2.6耐用性试验
        照上述“1.4”方法制备供试品溶液及对照品溶液,通过选择不同的色谱条件进行供试品含量测定,在改变流速(0.9ml/min~1.1ml/min)、柱温(28℃~32℃)、pH值(2.8~3.2)、流动相的比例[水(用磷酸调pH值至3.0)-乙腈(55.5:44.5)~水(用磷酸调pH值至3.0)磷酸钠-乙腈(54.5:45.5)]、不同色谱柱测定(Apollo C18,4.6×250mm,5μm)等条件下进行测定,阿齐沙坦含量为99.8%,RSD为0.50%,上述耐用性方法条件下均能满足本品阿齐沙坦含量检测要求。
        3.3样品测定
        取3批供试品,按上述“1.4”制备对照品及供试品溶液,及“1.3”方法进行测定,按外标法以峰面积计算阿齐沙坦含量,测定结果分别为99.9%、99.1%、101.5%,结果均符合规定。
        3讨论
        3.1检测波长的选择
        通过对本品对照品溶液进行波长扫描(图1),阿齐沙坦在波长末端有较大吸收,故选择210nm为测定波长。
       


        图1
        3.2流动相选择
        参照相关文献[3-8],通过流动相选择,确定流动相在 pH值为3.0及与乙腈比例为45%时,主成份峰峰形好,而出峰时间约在10分钟,与其他杂质峰的分离较好,因选择以水(用磷酸调pH至3.00)-乙腈(55:45)为流动相。
        3.3阿齐沙坦含量
        阿齐沙坦片是口服固体制剂,按平均片重计算,制剂中含阿齐沙坦应为标示量90.0%~110.0%。本法测得 3 个批号的阿齐沙坦片的含量分别为标示量的99.9%、99.1%、101.5%, RSD均小于0.5%,测定结果均在标准所规定的范围内,符合规定。
        综上所述,试验结果表明该方法简便 、快速、准确,适用于阿齐沙坦片含量的测定。
        参考文献
        [1]ZaikenK,ChengJW.Azilsartan medoxomil:a new angiotensin receptor  blocker[J].ClinTher,2011,33(11):1577.
        [2]曹聪,郑运亮,胡兴江等LC—MS/MS法测定健康人体血浆中阿齐沙坦的浓度及在药代动力学研究中的初探[J].药物分析杂志 2017,37(4)737-744.
        [3] 张敏,霍立茹,公晓伟等.HPLC法测定阿齐沙坦片含量[J].中国药房 2014,25(41)3907-3908.
       
       
      

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