酶联免疫法与金标法对梅毒的检测效果对比分析

发表时间:2019/3/15   来源: 《医师在线》2018年9月18期   作者:魏莉
[导读] ELIEA法可用于术前和输血前血清样本的筛查,而金标法可用于大量血清样本初筛,必要时行TPPA法进行确证。

(资阳市中心血站;四川资阳641300)
  【摘要】目的 分析和对比酶联免疫法与金标法检测梅毒的效果。方法 选取2017年5月-2018年3月我院住院患者术前和输血前抽取的血清标本2327例,均行酶联免疫法和金标法进行初步筛查,再行梅毒螺旋体胶体试验进行确证。观察检测结果。结果 ELIEA法和金标法梅毒阳性的检出率分别为1.07%和0.73%,差异不显著(p>0.05),且ELIEA法检测梅毒的准确度为96%,显著高于金标法(p<0.01)。结论 ELIEA法检测梅毒的准确度较高,且具有自动化的优势,在术前和输血前血清样本的筛查中具有较高的价值,而金标法具有检测迅速的优势,在大量血清样本初筛中的适用性较强。
  【关键词】:梅毒;酶联免疫法;金标法;梅毒螺旋体胶体试验
  [ 中图分类号 ]R2    [ 文献标号 ]A    [ 文章编号 ]2095-7165(2018)18-0344-01
  
  
  梅毒是感染苍白螺旋体引起的传染病,是《中华人民共和国传染病防治法》中的乙类传染病。世界卫生组织的统计资料显示,全球每年新增的梅毒病例约为1200万,梅毒螺旋体的感染可持续多年,且随着感染时间的推移,患者的症状也会由软性下疳发展为心脏、脑等多种组织和器官和神经的损害,对患者的生命安全造成严重的威胁,故有效的检测方法在梅毒的诊断和治疗中极为重要[1]。酶联免疫法(ELISA)和金标法是临床上常用的检测梅毒的方法,为了比较两种方法的检测结果,分析其临床适用性,笔者选取2327例血清样本进行了如下研究:
  1.资料和方法
  1.1一般资料
  选取2017年5月-2018年3月我院住院患者中术前和输血前抽取的血清标本2327例,来自于2327例患者,其中男性和女性患者分别为1178例和1149例,最小年龄和最大年龄分别为19岁和75岁,平均年龄(42.38±4.61)岁。
  1.2检测方法
  所有血液标本应用常规剂量的肝素进行抗凝处理,置于半径为15cm的离心机上,以3000r/min的速度进行5min的离心,分离出血清,并置于2~8℃的冰箱中保存。
  ELISA:以纯化处理过的梅毒螺旋体重组蛋白为抗原,包被和处理固相板条,加入经梅毒血清和辣根过氧化物酶标记处理的抗人体免疫球蛋白G抗体,之后应用全自动酶免分析系统检测血清中特异性梅毒抗体的数量。
  金标法:将相关试剂和待测血清样本平衡至室温后,将试剂条置于台面上,应用微量加样器将100μL的血清样本加入孔内,室温下静置20min,依照试剂盒说明书观察结果,即待检测区和对照组均有紫红色条带出现为阳性,仅对照组有一条紫红色条带出现为阴性。
  两种检测方法为阳性的标本需应用同批试剂进行复查,若结果未改变,行梅毒螺旋体胶体试验(TPPA)法进行确证,即将相关试剂置于室温下,于U型板上应用稀释液对血清进行稀释,之后分别加入致敏和未致敏的明胶颗粒,所有操作均严格按照说明书进行,孵育2h后对检测结果进行观察。
  1.3观察指标
  观察和分析检测结果。
  1.4统计学分析
  应用SPSS18.0软件分析和处理数据。p<0.05,则统计学差异明显,p<0.01,则统计学差异显著。
  2.结果
  2.1检测结果:2327例血液样本中ELIEA法检出梅毒阳性25例(1.07%),金标法检出梅毒阳性17例(0.73%),两种检测方法阳性检出率的差异不显著(p>0.05)(详见表1)。TPPA法检出梅毒阳性25例,其中ELISA法检测呈阳性20例,金标法检测呈阳性17例,ELISA法检测呈阳性5例阳性血清样本经TPPA确证后,阳性4例,阴性2例。计算可得ELISA法和金标法检测梅毒的准确度分别96%(24/25)和68%(17/25),统计学分析后,差异显著(X2=6.6396,p<0.01)。
  表1:检测结果的对比[n(%)]
 
  3.讨论
  性传播是梅毒传播的主要途径,近年来,随着人们思想的逐渐开放,性病的发生率逐渐增加,使梅毒的感染率大幅上升,且有研究指出,梅毒患者的免疫力下降,且患者存在性乱现象,导致患者感染艾滋病的易感性增加2~10倍[2],因此,梅毒的防治已成为医学和社会十分重视的问题。
  胶体金免疫结合试验是在酶免疫结合试验的基础上形成的一种测定固相标记免疫的新技术,是利用微孔滤膜包被已知抗原或抗体后加入待检标本中,使标本中的抗原或抗体经滤膜毛细管的作用结合微孔滤膜上包被的抗原或抗体,之后再行标记免疫层析分析检测,几分钟后即可用肉眼观察结果,具有快速、便捷的特点。本次研究中,金标法梅毒阳性检出率为0.73%。
  ELISA法对梅毒螺旋体特异性抗体的检测是应用微孔板包被梅毒特异性抗原后,经双抗原夹心法对梅毒螺旋体抗体进行检测,其中酶的放大作用和双重识别机制降低了假阳性和假阴性的检出率,且可检测出潜伏期和晚期梅毒,具有重复性、结果稳定等特点。本次研究中,ELIEA法梅毒阳性检出率为1.07%。
  TPPA试验是利用人工载体明胶粒子包被梅毒螺旋体菌株成分后,经纯化制成抗原,对血清中的梅毒特异性抗体进行检测,可检测出潜伏期和难以诊断的梅毒,是我国常用的确证梅毒的方法[3]。本次研究中,应用TPPA法对ELISA法和金标法的检测结果评估后,准确度分别96%和68%,ELISA法检测的准确度显著高于金标法(p<0.01)。
  综上所述,ELIEA法可用于术前和输血前血清样本的筛查,而金标法可用于大量血清样本初筛,必要时行TPPA法进行确证。
  参考文献
  [1]蔡县成,叶青,刘芳菲等.无偿献血者献血前梅毒螺旋体抗体快速检测结果分析及策略优化[J].国际检验医学杂志,2017,38(13):1784-1785,1789.
  [2]朱建奎.RPR、TRUST、TPPA、ELISA、TPAb五项联合在检测梅毒早期患者中的临床应用[J].中国实用医药,2016,11(15):100-100,101.
  [3]王艳华,于慕刚.不同血清学检测法诊断儿童梅毒的应用研究[J].中国妇幼健康研究,2016,27(11):1362-1364.

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