食品微生物检测技术的研究进展

发表时间:2016/5/25   来源:《系统医学》2016年第5期   作者:李秋
[导读] 了解了食品微生物常见的检测技术。结果,通过 调查了解了一些常见的检测技术,通过这些技术可以看出食品微生物检测技术的研究进展。探讨,随着科技的发展,食品微生物检测技术也在快速的进步。

李秋
绥化市北林区疾病预防控制中心  152412
【摘  要】目的,探讨了食品微生物检测技术的研究进展。方法,通过调查检疫部门,了解了食品微生物常见的检测技术。结果,通过 调查了解了一些常见的检测技术,通过这些技术可以看出食品微生物检测技术的研究进展。探讨,随着科技的发展,食品微生物检测技术也在快速的进步。
【关键词】食品微生物;检测技术;研究进展
【中图分类号】R851.8【文献标识码】A【文章编号】2096-0867(2016)-05-055-01
        前言:随着科学技术的不断提高,人民生活水平的日益增长,食品的安全问题越来越成为人们关注的焦点。在众多食品安全相关项目中,微生物及其产生的各类毒素引发的污染备受重视,微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的问题。国家对于食品卫生的检测力度也逐渐增强,食品微生物检验是评价食品卫生质量、保证食品安全、预防和控制食源性疾病的重要手段之一。因此,食品中关于微生物检测方法和技术的探讨也显得尤为重要。近年来随着分子生物学、微电子技术及生物技术的发展,食品微生物快速检验技术也有了很大的进展。
        作为微生物分类和鉴定的重要依据之一,传统的形态学和生理生化方法操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重,且需要大量专业技术人员参与。近年来随着分子生物学、微电子技术及生物技术的发展,食品微生物快速检验技术也有了很大的进展。因此,本文将介绍一些食品微生物检测技术。
1.资料与方法
1.1一般资料
        调查了一些相关的食品检测公司,这些公司的规模不同,并且其地点不同,通过调查了解他们所用的检测技术,继而发现检测技术的研究进展。
1.2方法
        对几家检测公司进行调查,通过询问与问卷调查的方法来了解一些生物检测技术。
2.结果
        从调查中发现常见检测技术包括分子检测技术,免疫学检测技术,代谢学技术。
3.讨论
3.1分子生物学方法
        PCR 检测技术是利用耐热DNA聚合酶的作用,通过变性一延伸一复性的循环操作,在体外将DNA模板迅速扩增数百万倍后,再通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增DNA产物的荧光条带,以确定微生物的特定种类的技术。PCR技术具有简易、快速、灵敏和高特异性的优点,可以扩增待检微生物目的DNA很快判断某种微生物是否存在。PC R技术还可以检测那些人工无法培养或难以培养的微生物,从而大大增加诊断检查内容和诊断能力。PCR反应是将模板DNA、引物、Taq酶、dNTPs,镁离子、缓冲液、双蒸水等混合物装在PC R微型管中,在可编程调控的PC R仪上完成。


PCR检测技术自从1985年发明以来,通过不断地完善与改进,应用于食品微生物检测中时具有较高的敏感性与准确性。PCR检测技术包括免疫PCR、多重PCR、反转录PCR等,每种PCR检测技术都可准确地检测到相对应的病菌与微生物。目前发展起来是多重PCR检测技术可以对几种微生物同时进行检侧。用此方法已经对乳酸菌、双歧杆菌等进行了精确的检测和鉴定,以及啤酒中淀粉酵母和啤酒酵母、水体中大肠杆菌和大肠菌群。另外,肉毒梭菌、沙门氏菌、变形弧菌等多种致病菌都有用PCR方法检测的报道。利用PCR检测细菌,可以快速、灵敏的检测样品中是否存在某些细菌或致病菌,尤其是那些人工无法培养的细菌,但它仅限于那些核酸序列已知的微生物的鉴定,并且在检测中不能区分活细胞和死细胞,同时其定量能力较差。
        核酸探针技术是用同位素或其他的标记方法对己知核昔酸序列DNA片段进行标记,将其加入到已变异的DNA样品。这样在一定的条件下就能和这种样品的同源序列的DNA区段形成杂交双联,达到鉴定DNA的目的。核酸探针技术检测食品微生物具有敏感性、特异性等优势,但其在检测时需对检测样品进行一段时间的培养,且检测方法及过程比较复杂,并对毒素污染的不含产毒菌的食品无法进行准确检测。
3.2代谢学技术
        电阻抗技术是近年来发展起来的一项生物学技术,己经开始应用于微生物的检测。电阻抗检测技术的检测原理是培养基中微生物在不断生长过程中,可将其电惰性底物代谢成为活性底物,进而使得培养基中电导性增大,且培养物的阻抗降低。另外,培养基中微生物在生长过程中可产生一种特征性阻抗曲线,可依据电阻改变的图形对检测细菌进行鉴定。通过检测培养基的电阻抗变化来判定细菌在培养基中的生长繁殖特性,即可检测出相应的细菌。该方法己用于食品中细菌总数、大肠埃希菌、沙门氏菌等微生物的检测,且具有高敏感、特异性、快速反应性和高度重复性等优点。
        放射测量技术是物理与化学诊断一体的新型检测技术,主要用于培养基中微生物的检验。根据细菌在生长繁殖过程中代谢碳水化合物产生二氧化碳的原理,把微量的放射性标记引入碳水化合物或盐类等底物分子中进行检测的技术。细菌生长时,这些底物被利用并释放出含放射性的‘4CV2,然后自动化放射测定仪BHCtPC测量‘4CV2的含量,来判断细菌的数量。
3.3免疫分析检测
        免疫荧光技术就是用荧光素标记的抗体检测抗原或抗付的免疫学标记技术又称荧光抗体技术。所用的壶光素标记抗体通称为荧光抗体。实际应用上主要有直接法和间接法。直接荧光抗体检测法是在杜样上直接滴加己知特异性荧光标记的抗血清,既洗涤后在荧光显微镜下观察结果。间接法是在杜样上滴加己知细菌特异性抗血清,待作用后经汾涤,再加入荧光标记的抗体后在荧光显微镜下观察结果。可用来对沙门氏菌、李斯特菌、葡萄球筐毒素、E.coli 0157和单核细胞增生李斯特氏菌等进行快速检测。
        酶联免疫吸附技术ELISA技术,最早出现于19世纪70年代,它是在酶助免疫吸附分析的基础上发展起来的一种快速、先进的现代食品微生物分析检测方法,酶联免疫吸附在食品微生物检测中运用较为广泛,最近儿年出现了更灵敏的显色剂和底物,提高了EL ISA的有效性。将特定抗原或抗体吸附于固相载体的表面,酶标记物与相应的抗体或抗原结合形成酶标记抗原杭体复合物,在遇到相应底物时,结合物上的酶催化底物产生水解、氧化或还原等反应,从而生成可溶性或不溶性的有色物质,可用肉眼或酶标测定仪判定结果,可根据颜色的深浅来定性、定量检测相应的微生物。随着单克隆抗体的出现,用此法检测的特异性有了明显的提高。目前已成功应用于蛋品、鲜奶、肉制品中沙门氏菌的检测。有报道称对沙门氏菌的检测其最低检测量可达500 cFu/g,仅需22h,对金黄色葡萄球菌的检测,可在18 h内完成1cFu/ g的检测。

参考文献:
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[2]叶思霞,蔡美平,罗艳娜.食品微生物检测技术研究进展[J]安徽农学通报,2009,15(19):181一192.
[1]陈晓珑,董煌,陈灿映,等.大肠菌群测试片中冷水可凝凝固剂初步研究[J].河南工业大学学报.2013,34(1):81一85.

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