黄丽芬 罗春英 韦花媚 黄小英
右江民族医学院附属医院病理科 广西百色市 533000）
【摘要】 病理住院医师规范化培训是提高病理医师队伍素质的一条重要途径，本文结合细胞病理学的特点，总结了病理住院医师规范化培训在细胞学技术方面的带教体会，旨在为培养基础技能扎实、实践能力强的人才队伍提供参考[1]。
【关键词】细胞学技术 规范化培训 带教体会
住院医师规范化培训是医学继续教育的重要组成部分，是培养高层次医学人才的重要环节和措施[2-3]。随着细胞学技术的飞速发展，为了能使细胞形态更完好的呈现出来，细胞的制片、固定及染色起到关键的作用。制片优良、染色清晰能为诊断医生创造良好的视野，有利于疾病的诊断。在最重要的细胞学瑞氏染色及巴氏染色两种染色方法中，要求规陪生必须熟练掌握它们的染色步骤及原理。
1.细胞制片室的现状
细胞制片室的日常工作：脱落细胞的常规制片及液基薄层制片术、细胞蜡块的制作、DNA倍体细胞学检测、骨髓染色，常用的染色方法是瑞氏染色、脱落细胞染色，常用的染色方法是巴氏染色、T淋巴细胞亚群免疫病理分析等。学生在进入细胞制片室培训时, 带教老师要求学生先熟悉范化培训大纲所要求掌握的内容, 包括实验原理、操作步骤、影响因素、临床意义等。然后在“放手不放眼”的原则下, 让学生大胆动手操作, 指导他们在实践中发现问题、分析问题和解决问题。由于规培生的技能考试内容包含瑞氏染色及巴氏染色，因此必须熟练掌握它们的染色步骤及原理。
2.操作技能
2.1 瑞士染色：瑞士染色的步骤其实很简单，但是要染好一张片很不容易。首先，时间比较难掌握，时间的长短跟片子的细 胞多少、厚薄程度、季节而定。作为带教老师会先把瑞氏染色的原理给规培生讲解，让他们有个概念，然后重点讲解步骤（2个步骤）并示范。接下来由规培生动手操作并口述，这样学生能很快的掌握步骤及染色时间。
2.2 巴氏染色：巴氏染色的步骤非常繁琐，原理也很难记。这时候，带教老师会使用比喻法来给学生讲解巴氏染色的原理，很生动，学生很快的就记住了。原理记住了以后，带教老师会慢慢引导规培生从里面总结出巴氏染色的主要步骤，即四大步骤：固定—核染色—胞浆染色—透明。最后再从四大步骤慢慢展开操作，掌握好每个步骤的时间，巴氏染色也就染好了。巴氏染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色, 可长久保存。但该方法采用的试剂较多，步骤较繁琐，前部分是染细胞核，后部分是染细胞浆及标本透明封固。每一步骤都会直接影响到细胞的着色效果，从而为涂片的诊断带来困难。因此，在巴氏染色操作中染色技术人员应具有高度的责任心和严谨的工作态度，需对每一个步骤熟练掌握，必须严格按照每个步骤的要求进行操作。力求排除人为因素的影响，以提高细胞涂片的诊断率[4]。
2.3 瑞氏染色及巴氏染色容易出现的问题：首先在瑞氏染色时，有些规培生染出来的片子不完整，经常缺了个角，为什么？ 是因为步骤1没有掌握好，带教老师在讲解时会反复强调滴第一染液时一定要覆盖血膜，这个步骤是起到固定细胞的作用，这样才不容易被第二染液（缓冲液）溶解。
还有的规培生染出来的片子背景不干净以及染料沉渣很多，影响阅片，这时带教老师就会根据经验教他们在冲洗片子的时候一定不能先倒掉染液，而是要先流水冲洗，冲洗完快速的过95%酒精再冲洗。在巴氏染色过程中，规培生容易出现操作不流畅, 动作不够干净利落，容易把上一缸的染色液带入下一缸，容易忘记每缸交替时甩干玻片上残存的液体，操作时不注意上下提拿染色架，动作太大，没有轻拿轻放等问题。因此，带教老师要求规培生必须边染色边口述，熟记每个步骤。
2.4 染色效果判断：染完色后规陪生必须会在显微镜下观察染色效果，掌握如果染色深了如何处理，染色浅了或者染不上色又如何处理。
2.5 还需了解的知识：脱落细胞的常规制片及液基薄层制片术、DNA倍体细胞学检测、细胞蜡块的制作及T淋巴细胞亚群免疫 病理分析这些只要求规陪生了解。
2.6 理论知识的巩固应用：目前的试剂基本不需要人工配制，商品化的试剂盒对反应原理及试剂成份未必有具体的说明。因此，试验前不但要仔细阅读说明书，更要回顾书本知识，明确每一步的理论依据及试剂成份，只有明确其中的原理和试剂成份，才能在试验中有的放矢，出现问题才能懂得原因所在。
3.质量控制
坚持染色技术持续改进、坚持优良制片。要加强规培生的质量控制意识培养。
4.职业防护
实验室内存在生物危害和化学危害，必须提高防护意识，做到标准防护，进入实验室要戴双层手套，穿工作服，戴帽子，手上不戴饰物，不留长指甲，不在实验室吃喝，工作中不要用戴着工作手套的手触摸头、脸等身体洁净部位。离开实验室必须脱手套，彻底清洁双手，脱去工作衣，更换鞋子。养成好习惯，才能在以后的职业生涯中保护好自己，甚至是你的家人。
5.实行实践与理论考核
规培生在规陪学习结束前，对其进行理论和实践操作进行出科考核，不仅对同学们在规陪学习期间学习的主动性和自觉性有积极的推动作用，而且可以使老师和同学们及时发现实习中的不足，对于没有掌握的知识和技能，进行强化辅导和学习。
6.小结
病理住院医师规范化培训是提高病理医师队伍素质的一条重要途径，本文结合细胞病理学的特点，总结病理住院医师规范化培训在细胞学技术方面的带教体会，旨在为培养基础技能扎实、实践能力强的人才队伍提供参考。病理细胞学检验的领域，涉及到人体各个部位的脱落细胞涂片，各种器官有黏膜的刮片、刷片以及针吸细胞学标本的涂片等。各种血液病细胞亦应属病理细胞医学的检验诊断范畴。各类涂片标本，经过瑞氏-姬姆萨、H-E、巴氏、伊红湖兰或多种细胞组织化学等染色后，达到客观、全面、最佳地反映细胞的形态、各个部分的结构特点，及组织化学成分的变化。通过细胞形态和结构的变化，来确认受检细胞的生理、病理变化性质，并结合病史、症状、细胞的组织来源，以及细胞医学工作者的组织学、细胞学和临床各科的医学素质，作出相应的细胞医学诊断报告，为临床提供诊断依据。
参考文献
[1]陈敏，张燕，唱凯．临床分子生物学检验住院医师规范化培训带教探讨［Ｊ］．国际检验医学杂志，2019，40（12）：892－894．
[2] 王辰，齐学进，陈昕煜，等 . 我国住院医师规范化培训制度的 正式建立与政策体系 [J]. 中华医学杂志，2015，95（14）：1041- 1043.
[3] 赵允伍，王珩，陈旭林，等 . 我国住院医师规范化培训问题分析 与对策探讨 [J]. 卫生经济研究，2019，36（3）：12-14.
[4]张名旭.宫颈细胞涂片巴氏染色有关问题的分析［Ｊ］中国误诊学杂志2010，10（12）：2876－2877
基金资助：广西学位与研究生教育改革课题（JGY2019165）；广西研究生教育创新计划项目（JGY2018120）