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血小板抗体检测在新生儿血小板减少症诊治中的应用效果

发表时间：2020/11/5 来源：《医师在线》2020年7月13期作者：高玉云孙婷

[导读] 血小板抗体（PAIg）检测在新生儿血小板减少症（NT）诊治中的应用效果

高玉云孙婷
（内蒙古自治区包头市中心医院输血科；内蒙古包头014010）
【摘要】目的血小板抗体（PAIg）检测在新生儿血小板减少症（NT）诊治中的应用效果。方法选取我院2018年12月-2019年12月期间收治的新生儿82例，根据身体状况分成两组，观察组（41例，NT患儿）和对照组（41例，健康新生儿），对比两组新生儿和观察组患儿中轻度和重度患者的PAIgA、 PAIgM 及 PAIgG 表达水平。结果观察组患儿的PAIg表达水平高于对照组（p<0.05)，轻度患儿PAIg表达水平低于对照组，其结果差异均有统计学意义（p<0.05)。结论新生儿NT 患者的病情情况与PAIg表达水平有很大的关系，是诊断该病的重要依据。
【关键词】血小板抗体检测；新生儿血小板减少症；应用效果
NT，是新生儿的一种常见疾病，一般都是由于母亲对胎儿不相容的血小板抗原产生同种PAIg，通过胎盘输入胎儿引起的[1]。如果患儿的出血情况比较严重的话，很有可能会造成其颅内出血等并发症。该病发病初期较为隐匿，出血表现不明显，被忽视的可能性很大，从而促使病情进一步发展，耽误治疗。目前，对于此病还没有一个统一的诊断标准，但是PAIg是检测该病的重要指标。基于此，本文将对PAIg检测在新生儿NT诊治中的应用效果，报道如下：
1、资料与方法
1.1一般资料
选取我院2018年12月-2019年12月期间收治的新生儿82例，根据身体状况分成观察组和对照组，各41例，观察组男性25例，女性16例，发病时间3-29d，平均时间（11.25±1.67）d，轻度28例，重度13例；对照组男性24例，女性17例，出生时间2-29d，平均时间（11.36±1.84）d。两组一般资料对比结果不具有统计学意义（p>0.05)，有可比性。
1.2纳入与排除标准
纳入标准：外周血血小板（PLT）计数低于100×109 /L者；出现 NT 不低于2 次者；家属同意本次研究。
排除标准：家族遗传代谢病严重者；中途退出本次研究者[2]。
1.3方法
　　仪器和试剂使用BD FACS Calibur 流式细胞仪、 FTIC标记羊抗人 IgA、 IgM、 IgG 型单克隆抗体，PBS 缓冲液;台式低速离心机。
于早上所有新生儿空腹状态下静脉抽取5mL血液，并放置于EDTA－Na抗凝试管中，轻轻摇晃使其混合均匀，再进行800r/min离心 15min工作，将富PLT血浆进行分离，再将富PLT血浆以 2500r/min 离心 5min，然后取出血浆后加入 5mL左右溶血剂，在一旁放置10min，再以 2500r/min 离心 5min; 取出血浆后加入PLT5mL的洗涤剂，再进行2500r/min 离心 5min，使用同样方式洗涤3遍，加入PLT稀释液将其浓度转换到 20 × 109 /L。在3支试管之中分别倒进 50μL 的PLT悬液均为10μL 的PAIgA、 PAIIgM、 PAIIgG 同型抗体; 再另外的3 支试管中分别倒进 50μL 的PLT悬液及均为10μL的 FTIC 标记羊抗人 IgA、IgM、IgG 型单克隆抗体。完成后，轻轻摇晃试管让完全混合均匀，在正常室内温度环境中不透光进行孵育，时间为 15min。每一支试管都分别加入 500μL PBS，完全摇晃均匀之后用仪器进行检测。在检测前，按照预热相关标准进行调试，以免发生质量问题，检测所有标本中的阳性%及发射荧光的光强度。
1.4观察指标
（1）对比两组新生儿的PAIgA、 PAIgM 及 PAIgG 表达水平。

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（2）对比观察组患儿中轻度和重度患者的PAIgA、 PAIgM 及 PAIgG 表达水平。（PLT计数在 50 -100×109 /L为轻度，小于50×109 /L为重症。）
1.5数据处理
本文研究数据应用统计学软件spss22.0对资料数据进行分析处理，计量资料数据采用平均值±标准差（）来表示，计量资料数据的对比采用t检验，用P＜0.05表示其结果差异有统计学意义。
2结果
2.1两组新生儿PAIg表达水平（%）
观察组患儿的PAIg表达水平高于对照组（p<0.05)。
观察组41例患者中，PAIgA为（8.98±2.36）， PAIgM为（12.95±4.87）， PAIgG为（17.98±8.65）；对照组41例患者中，PAIgA为（1.36±0.65）， PAIgM为（3.84±0.91）， PAIgG为（4.36±1.52）。
2.2中轻度和重度患者PAIg表达水平（%）
轻度患儿PAIg表达水平低于对照组（p<0.05)。
轻度28例患者中，PAIgA为（7.65±2.95）， PAIgM为（10.41±3.69）， PAIgG为（12.25±6.01）；重度13例患者中，PAIgA为（11.63±2.88）， PAIgM为（18.56±5.10）， PAIgG为（29.10±9.22）。
3讨论
PLT是人血液中的一种成分，在血液中的作用主要是凝血，防止血液大量流出，起到很好的保护人体血液不流失的作用。NT的发病原因其实是凝血功能出现了障碍，所以这种疾病的严重程度也是根据凝血因子的浓度来决定的，一般5%以上，30%以下是轻度患者。新生儿时期NT特征是皮肤广泛性瘀点瘀斑，甚至出现胃肠道出血和颅内出血等、PLT减少、毛细血管脆性试验阳性、出血时间延长和血块收缩时间延长且不完全，而凝血时间在正常范围内。新生儿NT发生率为18%-35%，与胎龄成反比，胎龄小发生率高，很有可能造成出血、神经系统后遗症，甚至死亡。因此，患者必须要尽快的诊断并救治，如发生颅内出血病情迅速恶化，预后不良，可导致10%以上的新生儿死亡，存活婴儿多有神经系统后遗症。
本文通过对PAIg检测在新生儿NT诊治中的应用效果研究发现：新生儿NT的PAIg表达水平高于正常的新生儿（p<0.05)，轻度患儿PAIg表达水平低于对照组（p<0.05)。本文的研究结果和石元耀等[3]相关的研究报道结果较为相似，证实了PAIg检测在新生儿NT诊治的应用效果显著。PAIg 会对巨核细胞产生一定的影响，并通过其发育、凋亡影响患者的PLT数量；而且α颗粒的把所含的物质或能量大量的放出来，造成 PAIg 上升，加速了对PLT的破坏。因此检测PAIg的表达水平可以有效的对新生儿的NT提供诊断的依据， PAIg 的不正常上升会造成PLT破坏，而且还会抑制PLT的聚集，通过活化PLT，使患者的出血情况越来越严重。因此， PAIg 的表达水平与可以判断NT的病情程度指标。
综上所述，新生儿NT诊治中，PAIg检测可以作为诊断该病的重要依据，应用效果良好。
参考文献
[1] 黄旭成,曾莎莎.微柱凝胶免疫分析法在新生儿免疫性血小板减少症自身抗体检测中的应用分析[J].标记免疫分析与临床,2018,25(3):313-316.
[2] 黄雪原,陈秉宇,周明, 等.血小板抗体检测的多中心临床应用调查—基于中国10家单位的2338例病例对照研究[J].临床输血与检验,2020,22(2):113-117.
[3] 石元耀,王晋.血小板抗体检测在新生儿血小板减少症诊治中的应用[J].内蒙古医科大学学报,2019,41(2):144-147.