杨永兰 普兆丽
（云南省中医医院检验科；云南昆明650021）
【摘要】目的：调查了解昆明地区女性HPV感染及基因亚型分布情况。方法：采用PCR+导流杂交技术对7207例患者进行HPV分型检测。结果：HPV感染率为17.26％。其中高危亚型感染率为14.96％，低危亚型感染率为2.30％。在高危型别中，感染率最高的是52型，检出率前3的亚型依次为HPV 52、16 、58 型。结论：昆明地区女性HPV总感染率17.26%，以单一感染为主，检出率最高的高危亚型是HPV 52型，和其他地区检出率最高的16亚型有所差别。
【关键词】HPV分型；HPV 52亚型；单一感染
人乳头瘤病毒(HPV)是一种嗜人体皮肤和黏膜组织细胞的DNA病毒，可广泛感染人类皮肤及生殖道、呼吸道上皮组织，它与人类多种良恶性肿瘤密切相关。世界范围的流行病学资料表明，HPV 感染基因型分布存在地域性差异，其致癌性和后果也不同[1]。现对昆明地区女性患者进行HPV 分型检测，就感染情况进行分析，探讨昆明地区女性HPV易感型别和流行特点。
1 材料与方法
1.1一般资料 共统计2013年8月至2017年2月到本院就诊的7207例女性患者，年龄16至67岁。采样和标本保存按SOP文件进行.
1.2仪器和试剂：西安天隆NP968全自动核酸提取仪及其配套提取试剂，杭州博日扩增仪(BIOER)，潮州凯普医用核酸分子杂交仪(HHM-2)；人乳头状瘤病毒21分型检测试剂盒(PCR+膜杂交法)购置潮州凯普生物化学有限公司。
1.3方法：
1.3.1样本采集和处理：宫颈脱落细胞，DNA提取及样本保存严格按照实际说明书要求执行。
1.3.2检测内容：21种常见型别，包括14种高危型别：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68；1种疑似高危型别：HPV53；6种低危型别：HPV6、11、42、43、44、CP83042
2 结果
2.1 昆明地区女性HPV感染情况 对7207例标本进行HPV分型检测，HPV总感染率为17.26％(1244／7207)，高危型感染率14.96％(1078／7207)，占总阳性86.66％；低危型感染率2.30％(166／7207)。
2.2 HPV单一及多重感染情况 单一HPV型别感染率13.61%(981／7207)，占总阳性78.86%，排前五的亚型依次为HPV 52(17.64%)、16型(13.05%)、58型(10.50%)、Cp8304型(10.40%)、53型(7.03%)；2个及以上型别的多重感染率为3.65%(263／7207)，伴随52型的多重感染高达42.21%，伴随Cp8304型的多重感染23.57%。单一感染和多重感染合并统计，HPV感染率22.37%(1612／7207)，高危亚型感染率18.54(1336／7207)%，占总阳性的82.88%，排前5的亚型依次为HPV 52(21.18%)、16型(14.67%)、58型(12.2%)、53型(9.0%)、39型(7.78%)；低危亚型HPV感染率3.83%(276／7207)，排第一的亚型是HPV Cp8304型(59.06%)。HPV各亚型阳性率最高的是HPV 52(17.56%，283/1612)，其次是16型(12.16%)、58型(10.11%)、低危Cp8304型(10.11%)。详见图表。
图表：7207例女性HPV分型单一感染和多重感染合并统计阳性构成比
2.4病例按年龄分为6组，各组占总阳性构成比：< 20岁,1.53%（19/1244）;20—30岁,44.37％（552/1244）;31—40岁,27.33％（340/1244）;41—50岁,17.04％（212/1244）;51—60岁,8.36％（104/1244）;> 60岁,1.37％（17/1244）。
3讨论
本研究检测病例20岁-50岁三组合计感染率约占总阳性率的90%，证明20-50岁为感染高峰年龄段，可能与性生活频率及性伴侣数量有关联，宫颈癌筛查工作应在这个年龄段大力宣传普及。
在HPV阳性病例中，高危型感染占86.66％。以单一型别感染为主，感染率最高的是HPV52型（17.64%）；混合感染以二重和三重为主，伴随52型、16型和58型感染者共占多重感染的91.25%，而伴随52型感染的多重感染高达42.21%；伴随Cp8304型感染者23.57%。证实昆明地区HPV52型是最易感染的，也验证HPVCp8304型确实是中国人感染率最高的低危亚型。
中国地域广大，民族众多，各地有关HPV易感染型别不同，下表是近年各地报道情况：
本文调查HPV病毒在昆明女性中感染率为17.26％，排在前三的HPV 亚型依次为HPV52、16、58 型，这与谢松刚等[7]的研究一致。本研究HPV52型单一感染和多重感染感染率统计均居首位，其致癌性值得关注；感染率与上表近年各地文献报道相比稍偏低，可能与标本来源中含部分体检标本所致。由于各地检测HPV分型的试剂厂家和检测方法不同，不同医院病人来源不一，患者病情轻重不一，所以统计结果有差别。在这些文献报道中，HPV16型始终位于第一、二位，该型别有着较高的感染率和致癌性。2010年，在包括欧洲、美洲、南美洲中部、非洲、亚洲、太平洋地区在内的全球回顾性横断面研究显示，子宫颈癌中HPV感染各亚型位于前8位者依次为HPV16、18、31、33、35、45、52、58型[8]。世界卫生组织调查报告发现中国最常见的5种高危HPV型别分别是16、18、58、52和33，中国93%的宫颈癌由这5种型别感染所致。上表中，感染率排前三位的HPV高危亚型都在内，但52型和58型感染率明显靠前，其意义值得进一步探究。
由于不同地区和种族的人群HPV感染的亚型不尽相同，而不同亚型HPV感染与子宫颈癌的关系也不一样。Fife等[9]研究表明，持续感染HPV 16、52、18、33型是直接致癌因素，而其他型别多重感染则有促癌作用。Lee等[10] 进一步研究了多重HPV感染与宫颈癌的关系，发现单一HPV感染使宫颈癌的患病风险增加19.9倍，而多重HPV感染使该风险增加到31.8倍。建议适龄女性每2年到医院进行HPV-DNA分型检测以筛查宫颈癌，对检测阳性者应结合阴道镜和病理细胞学检查技术，早日干预宫颈内瘤样病变，减少宫颈癌发生。
HPV疫苗是针对不同亚型感染研发的，这是研究不同地区感染HPV不同型别的意义。以上各地区易感HPV型别资料尤其是52型和58型感染率靠前的研究数据，可为中国各地区HPV 疫苗的研制和应用提供理论依据。
参考文献:
[1] De Martel C , Plummer M , Vignat J , et al. Worldwide burden of cancer attributable to HPV by site, country and HPV type[J]. International Journal of Cancer, 2017.
[2] 马莉,丛笑,卞美璐,等.高危型HPV分型检测作为子宫颈癌及其癌前病变初筛手段的探讨[J].中华妇产科杂志,2015,50(4):246-252
[3] 关琳琳,房玮,王炜,等.山西省及太原周边地区HPV流行状况及癌前病变分析[J].中国保健营养,2017,27(30)：13
[4] 曹佩霞, 陈兰, 施如霞, et al. 常州地区女性人乳头瘤病毒感染及基因型分布特点分析[J]. 国际检验医学杂志, 2017, 38(23).
[5] 刘昊虹, 徐霞. 韶关地区7980例女性HPV感染与基因分型[J]. 热带医学杂志, 2018, v.18(05):65-68+97.
[6] 王京伟,赵礼文,吴薇,等.湖北地区9058例女性人乳头瘤病毒基因分型分析[J].微循环学杂志,2017,27(2): 37—42
[7] 谢松刚,张玲.江苏扬州地区4682例女性高危型人乳头瘤病毒感染结果分析[J].实用临床医药杂志,2019,23(08),88-91
[8] Ronco G, Giorgi-Rossi P, Carozzi F, et al. Efficacy of human papillomavirus testing for the detection of invasive cervical cancers and cervical intraepithelial neoplasia: a randomized controlled trial[J]. Lancet Oncol, 2010, 11(3):249-257
[9] Fife KH,Cancer HM,Schroeder JM,et al.Defection of multiple human papillomavirus types in the lower genital tract correlates with cervical dysplasia.Med Virol,2001,6,4:550-559．
[10] Lee SA,Kang D,Seo SS,et a1.Multiple HPV infection in cervical cancers creened by HPV DNA chip.Cancer Lett,2003,198:187—192．