朱玲
安岳县妇幼保健计划生育服务中心，四川省资阳市642350
通常情况下，只要去医院看病，医生首先建议患者检查一下血常规，而血涂片是血常规检查中必不可少的工具。医护人员利用显微镜通过血涂片对血液内的细胞进行检查，可以及时发现各种血液中潜藏的疾病，为此，血涂片的制作与染色直接影响着血常规检查的质量和效果。那么，怎样制作一张满意的血涂片呢？
1、装片清理
首先，将香皂或肥皂粉水烧开，放入装片煮沸20分钟。其次，用开水将装片表层的香皂和血膜等污垢清洗干净，之后用饮用水进行反复清洗。最后，用纯净水将装片再次清洗3-5次。必要情况下，需要将装片在95%浓度的乙醇中完全浸泡1小时，之后将其表面擦拭干净或者风干留置备用。此外，新装片需要在95%浓度的乙醇中浸泡24小时，也可以在10%浓度的盐酸中浸泡24小时，之后用自来水将其表面进行全面清洗，留置备用。
2、标本采集的收集
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血液是制作血涂片过程不可或缺的内容，因此，在制作血涂片之前，需要先进行标本的采集。首先，用75%浓度的乙醇将无名指进行消毒杀菌，待手指上的乙醇风干之后，戳破手指皮肤，使血液自然流出，自此过程中，采集人员万不可用力挤压手指，迫使血液排出。其次，取干净载片，让患者戳破的手指距离载片4毫米-5毫米处滴入血液。此时采集人员的手指需要持握载片的边缘，千万不能让手指触及载片表面，也不能让患者戳破的手指触及载片表面，采血之后要快速推片，以免血液凝固。如果从抗凝管取血，采集的血液一定要保证新鲜，否则容易使血液中的血细胞遭受破坏。
3、血涂片的制备
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装片规格标准：1.0mmx26mmx(76±0.5)mm。推片规格标准为：推片边沿必须齐整、光滑。血涂片制作的好坏与血滴大小、推片角度和推片速度息息相关。推片时，血滴越大，推片角度越大，推片速度越快，则血膜越厚。与之相反，血膜越薄。
血膜之所以发生分布不匀的现象，可能是推片不齐，也可能是用力不均，如果以上两种情况都不存在，那么还有一种可能性，那就是玻片本身没有清洁干净。
想要制作一张满意的血涂片，推片时，用力均匀和保持正确角度是最基本条件。如果用力太轻，就会使涂抹膜过厚无法观察，并且不可以推第二次。如果用力过重的话，就会使血细胞受到破坏。
血涂片制作完成之后，可以在空气中用力挥动，促使其迅速干燥，这样可以有效防止血细胞发生皱缩。血膜干燥之后，应当立即固定染色，以免细胞受到污染而使其溶解，同时如果放置时间长的话，会影响其观察效果。
血膜片要求：血膜均匀，薄如蝉翼，尾部形如弧状，血膜具有头体尾不同厚薄区域。此外，需要根据患者的血液状态，包括贫血水平、血液粘稠度、白细胞多少等因素，适当调整推片方法。
4、血涂片染色
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目前，市面上销售的瑞氏迅速染色液可以快速、清晰的观察出细胞形态，但是这种染色液对红细胞具有较强的破坏性，为此，先使用传统的瑞氏染色液将血膜遮盖，之后再添加瑞氏迅速染色液，最后加入缓冲液，缓冲液的使用量一定要保证充足，并且将其进行充分搅拌。
染色时间：如果正值夏季，缓冲溶液和染色液的使用量可以适当多添加一些，时间相对缩短一些，不然的话染色液蒸发速度较快，容易使染料沉积于细胞上，不容易分辨，影响读片实际效果。如果染色过浅的话，可以按照上述染色步骤将其再重新染一遍。
在用自来水进行冲洗时，冲洗动作尽量缓慢，使染色液沉渣和染色粒浮去，充分发挥其分色作用，只有将细胞染色中的浮色全部除去，才能清晰的显示出细胞核结构、形态、待干、镜检。
如果涂片上有色渣，有三种清除方法：第一，在涂片上添加伊红-甲基蓝染液，略加摆动涂片，使涂片上的色渣溶解于甲醇中，待到甲醇充分挥发之后，加蒸馏水或缓冲液。第二，把涂片放进水槽中，保持水平状态，涂片上的色渣就可以从玻片边缘溢出。第三，将涂片呈45°倾斜，吸管吸入95%浓度的酒精，缓缓地滴到涂片表面，直到滴下的酒精变蓝，在用清水将其表面冲洗干净，晾干留用。如果涂片上有香柏油，用擦镜纸将其擦去，之后用酒精处理。想要准确的判断染液是否充分发挥其染色作用，可以在冲洗染色液之前，对染色液进行细致观察，看它表面是否有一层黄色的金属光泽，如果有的话，则表示染色成功，反之，则表示染色失败。
5、检验人员的素质
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想要制作一张优良的血涂片，不仅需要制作人员具备超高的专业素养和丰富的工作经验，而且还需要其熟练的掌握各种细胞的正常形态以及细胞特异性改变后的形态。除此之外，制作人员还要全面熟知不同的细胞在血膜大致分布状况，对制作失败的血涂片具备准确的分析能力和判断能力，可以快速准确的找出血涂片制作失败的原因。
周围血涂片检查包括以下几项：第一，红细胞形态。包括红细胞大小和血红蛋白含量改变、红细胞形态改变以及红细胞中的异常结构。第二，粒细胞形态。包括粒细胞是否有中毒性变化、中性粒细胞是否有核左移、核右移以及分叶过多的现象、涂片中是否有异常细胞核幼稚细胞。第三，血小板形态。包括是否存在扎堆状况、有无巨大血小板和小巨核细胞。
总之，想要制作一张满意的血涂片，每一个制作环节都要精细，同时还需要具备一定的耐心，认真细致的完成每一个制作环节。