朱珏
（阆中市人民医院病理科；四川阆中637400）
摘要：目的：研究胸腹水细胞块与免疫组化在病理诊断中的应用效果。方法：选取2017年2月～2019年2月在我院经手术活检证实的46例恶性胸腹水积液患者作为研究对象，对这些入选患者的胸腹水细胞块样本实施HE常规染色和免疫组化染色，比较两组染色方法的诊断结果。结果：采用细胞块结合免疫组化染色在病理诊断中的阳性率显著高于HE常规染色，比较差异有统计学意义，P＜0.05。结论：免疫组化染色联合细胞块的细胞学检查，可提升对恶性胸腹水肿瘤细胞的阳性率，具有较高的诊断价值，值得临床应用。
关键词：胸腹水；细胞块；结合；免疫组化；病理；诊断
胸腔积液是指胸膜腔内液体积聚太多的一种常见临床症候，胸膜腔是脏层与壁层胸膜之间的间隙，正常人胸膜腔有5-15mL液体，有助于呼吸时气道润滑作用，此处每天有0.5L-1L的液体形成与吸收，任何原因均可导致胸膜腔内液体的增多和减少，此病多由肺炎、肺癌等引起，多数预后良好，但恶性胸腔预后较差，临床较为常用的诊断方法为胸腹水脱落细胞学检查，但是单纯细胞形态学提供的病理诊断准确率低于病理诊断，因此，增加了疾病的诊断难度，为了提升细胞病理诊断的准确率，为临床治疗提供可靠的依据[1]。本文就细胞块与免疫组化联合应用在胸腹水脱落细胞学检查中的诊断效果进行研究，现将结果报告如下。
1.资料及方法
1.1一般资料
选取2017年2月～2019年2月我院收治的46例胸腹水患者参与本次研究，经手术活检证实均为恶性肿瘤伴胸腹水，包括男性29例、女性17例；年龄39-69岁、平均（58.45±5.67）岁，其中胸椎25例、腹水21例；体液容量75-560mL、平均（325.6±75.4）mL，液体颜色均为淡黄色或血色，入选的这些患者中包括肺腺癌14例、恶性间皮瘤3例、鳞状细胞癌14例、小细胞癌12例、肺鳞癌3例。
1.2方法
入选患者胸腹水液基细胞进行细胞块制作，采用HE常染色剂免疫组化染色。细胞学涂片的制作：抽取胸腹水样品静止30min后，用吸管吸取距离瓶底的液体，吸取8mL放置离心管中，以3500r/min的转速离心15min，放弃上清液，将底部沉淀物涂在切片上固定，采用瑞士-姬姆萨进行染色，直到涂片呈紫红色。细胞块切片制作：将超过200mL的积液样本在室温下静置6h，去掉上层清液后保留100mL底液，按9:1的积液量与甲醛溶液进行配置，将积液放入40％甲醛溶液中，摇匀，防止离心管以3500r/min的速度离心15min，将沉淀物脱水后浸蜡、包埋进行HE染色。
免疫组织化学染色：选一种抗体适用于细胞涂片形态学，采用En Vision两部法进行免疫组化，严格按照说明书操作，选用的一抗试剂为SP、CR、EMA、CEA、DES、Vim、CK7、CK20、CK5/6、TTF-1、CA125等，切片厚度为4μm，用防脱玻片裱切片，在高压、高温下修复，将一抗样本放置4℃冰箱内放置一夜，DAB显色后，用苏木素复染。
1.3观察指标
对比两种染色方法的阳性率，阳性判定标准：TTF-1以及CR等免疫组化标记物阳性表达定位在细胞核；CK5/6、CEA以及EMA阳性表达定位在细胞膜；DES、Vim、CA125、CK20阳性表达定位在细胞浆，可见棕黄色颗粒分布，目标细胞超过10％为阳性。
1.4统计学分析
采用统计学软件SPSS21.0处理研究数据，计量资料：“”，检验；计数资料：（），2检验。P＜0.05：差异有统计学意义。
2.结果
常规染色实施病理诊断阳性准确率84.78％（39/46），采用细胞快联合免疫组化实施病理诊断的阳性诊断准确率97.83％（45/46），两组比较差异，2=4.929，P=0.026。
3.讨论
胸腹水是指病理性液体积聚在机体胸膜腔中导致的胸闷气短、呼吸困难等临床症状。胸膜腔中的液体因为多种因素造成吸收减少或增多的情况，会造成胸腹水，而恶性肿瘤患者出现的典型症状就是胸腹水。因此，胸腹水在对疾病诊断、治疗中发挥着重要的作用。影像学可检查积液量及位置，但细胞学检测依然是病理诊断肿瘤良恶的金标准[2]。
常规使用细胞离心沉降液图片诊断的准确率很较低，但细胞块进行切片可大量保存，采用免疫组化方法结合胸腹水细胞块可作为传统细胞图片的辅助方法，弥补传统细胞涂片的缺点。胸腹水细胞沉渣石蜡切片的制作方法相对简单，将制取沉渣石蜡包埋后可连续切片，能集中细胞，避免遗漏。蜡块制取的切片可避免细胞因涂片太厚出现结构不清晰、重叠、成团的现象，掉片发生的几率不大，可进一步提高染色定位的准确性和可靠性[3]。免疫组化是利用已知的特异性抗体对细胞内未知抗原实施检测，根据形成的有色反应，对细胞分布、细胞活性、定位等情况以显示。制作胸腹水细胞快进行免疫组化染色有利于将细胞集中起来，观察更方便，且有和组织块相似的处理过程，使抗原受损及阳性细胞脱落的问题得到解决，可取得和组织块相同的结果，将检测的阳性率提高，更有利于对组织的判断，提高了病理学诊断的准确性，降低了误诊、漏诊的发生率[4]。同时，采取免疫组化联合细胞快可对恶性肿瘤的肿瘤进行区分，CEA、TTF-1常用于腺癌细胞、恶性间皮细胞及增生现象的间皮细胞；TTF-1抗体主要为甲状腺上皮和肺上皮，而此抗体在鳞癌和其它多种癌中呈阴性表达；间皮瘤以及间皮肿瘤中并不存在CEA抗体表达，但主要标记上皮细胞肿瘤，故CEA抗体可对间皮瘤和癌进行有效区分。因此，利用免疫组化可有效协助医师对疾病的诊断和鉴别[5]。本研究结果显示，细胞块联合免疫组化实施病理诊断的阳性诊断准确率高于常规染色，有显著的统计学差异，P＜0.05。
综上所述，采用细胞块联合免疫组化染色技术可显著提高胸腹水病理诊断的准确性，提高对肿瘤细胞诊断的阳性率，值得临床推广应用。
参考文献
[1]刘露露.胸腹水细胞块切片结合免疫组化用于病理诊断的价值体会[J].中国社区医师,2019,35(30):118-119.
[2]王德玉,向思敏.病理诊断中胸腹水细胞块结合免疫组化[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(24):172-177.
[3]张椽,陈志涛,邹远芹,等.胸腹水细胞块改良法在免疫组化中的应用[J].甘肃医药,2018,37(12):1059-1061+1068.
[4]程玲瑗,黄小妹.免疫组化在胸腹水细胞块中的应用[J].甘肃医药,2017,36(04):302-283.
[5]杨晓林.胸腹水细胞块切片结合免疫组化用于病理诊断的价值[J].中国药物经济学,2017,12(01):118-120.