蔡光政
（镇江市第一人民医院；江苏镇江212000）
【摘要】目的：对液相色谱-质谱联用法测定中药制剂中双胍类化学药物进行研究。方法：采用色谱以及质谱条件结合仪器将样品与对照物进行对比，对中药制剂中非法掺入的双胍类化学药物进行测定。结果与结论：液相色谱-质谱联用法灵敏度高，选择性强，可作为分析检测非法中药制剂的有效手段。
【关键词】液相色谱-质谱联合法；中药制剂；双胍类化学药物
双胍类降糖药中包含苯乙双胍与二甲双胍，主要作用为控制患者血糖含量，具有一定降糖作用，但由于化学药物自身具有副作用，所以属性中含有一定有毒物质[1]。糖尿病患者增加与中药降糖药物的安全性影响，中药降糖制剂备受患者青睐，因需求供应不足，市场中将双胍类降糖药非法掺入中药中，若长期服用对患者身体健康具有一定威胁[2]。为保障患者用药安全性，应对中药生物制剂中非法掺入的双胍类化学药物给予检测，同时应建立灵敏、可靠的检测方法，本文建立了液相色谱-质谱联用法，内容如下。
1 资料与方法
1.1仪器与试药
Agilent 1200-6320型液相色谱-质谱联用仪，此液相色谱-质谱联合仪配有Agilent 1200液相系统，柱温箱、自动进样器、四元梯度泵，二级管阵列检测器（DAD）,电喷雾离子化源（ESI）。盐酸二甲双胍对照品（生产厂家：深圳中联制药厂，批号：200204114）；盐酸苯乙双胍对照品（生产厂家：湖北心迎合医药有限公司，批号：YJ-100922）；“纯中药制剂”降压药样品A、样品B（湖北省药品检验所）；甲醇为色谱纯，醋酸以及醋酸铵为分析纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1色谱以及质谱条件
色谱柱：Agilent C18柱（150mm×4.6mm,5µm)；流动相：0.02mol/L醋酸铵溶液（将醋酸PH值调节至3.5）-甲醇（70:30）；流速：0.3ml/min；柱温：30℃；检测波长：235nm；进样量：10µL。电喷雾离子源（ESI)，正离子检测方式（ESI*):m/z范围为50-300；离子源喷射电压为5kV,雾化电压为40psi，干燥气（N2）流速为10L/min，干燥气温度为350℃，毛细管电压为15V。检测方式采取全扫描一级质谱、选择离子二级全扫描质谱。
2.2溶液制备
取5mg盐酸二甲双胍以及验算苯乙双胍对照品，放入50ml量瓶中，将甲醇溶解稀释至刻度并摇匀，作为对照品储备液；将上述产品储备液各取1.0ml，放置同一量瓶中，加入流动相稀释至刻度并摇匀，作为对照品溶液。将不同批号的被测试胶囊各取10粒，将内容物取出并且摇匀，取约300-400mg胶囊内容物质量样品，放置50ml量瓶中，分别加甲醇超声15min，静置，取上清液离心（10000r/min,离心15min），取离心处理后上清液1.0ml，分别放置在10ml量瓶内，加流动相稀释至刻度并且摇匀，为供试品溶液
2.3对照品色谱以及质谱行为
结合上述样品与对照品的色谱以及质谱图得出，样品A中掺有二甲双胍，样品B中掺有苯乙双胍。
2.5最底检出限
取对照品溶液，进行梯度稀释后测定，二甲双胍最低检出限为0.5ng，苯乙双胍为0.3ng（S/N=3）。
3 讨论
糖尿病为我国常见病症，近几年呈上升趋势，因人类生活水平不断提高，糖尿病患者更加注重自身健康，因中药制剂安全度更高，所以在药物选择中更加倾向于中成药物，因市场中，中成药物较为紧缺，所以不良商家对化学药物进行非法添加，若在中药中非法掺入化学药物，则会影响患者治疗效果，双胍类化学药物成分主要以降糖成分为主，长时间服用，具有潜在生命威胁。本文以患者服药安全作为出发点，将中药制剂中非法添加双胍类化学药物检测方法中灵敏度进行试验，对比中发现，在双胍类药物进行洗脱时，应给与一定保留时间，避免双胍类药物中强碱类物质洗脱困难；考核标准中以柱效、分离度、两化合物中物理化程度为主要因素，将流动相应弱酸性以及本流动相系统进行确定；化合物在脱去胍后易产生特征碎片在离子m/z60，将对照品中药物保留时间与一、二级质朴信息相结合，同时将结果进行对比后给予判定，判定样品中本乙双胍与盐酸二甲双胍中含量；中药制剂中成分影响紫外检测器检测，其结果易产生假阳性，本实验中二甲双胍与实验中样品B在时间上保留一致时，则会出现色谱峰，若未出现二甲双胍准分子离子峰，则证明样品无此类化学药物。研究中，此检测方法可准确检测出不良化学成分，具有较高准确率，同时为患者药物使用安全做出一定贡献。
综上所述，内容中检测方法对中药非法添加化学物具有较高检测率，在临床用药检测中具有一定意义。
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