摘要：目的 验证金银花、苦杏仁、桔梗及甘草复配是否具有清咽功能。方法 按照《保健食品检验与评价技术新规范》， 采用大鼠棉球植入、大鼠足趾肿胀、小鼠耳廓肿胀3种实验方法。分别将大鼠按体重随机分为3个剂量组(分别为1.25g/kg·bw/d、2.5g/kg·bw/d、5g/kg·bw/d) 和1个阴性对照组，分别给予不同浓度的受试物和蒸馏水，每天1次，连续32d。实验结束当天再给一次受试样品， 计算肉芽肿净量、足趾肿胀率和耳廓肿胀率。结果 低、中、高剂量组大鼠肉芽肿净重， 2、4h中、高剂量组及6h高剂量组大鼠足趾肿胀率，高剂量组小鼠耳廓肿胀率，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 清咽利喉颗粒清咽功能的动物试验结果为阳性。
关键词：金银花；苦杏仁；桔梗；甘草；清咽
咽炎为常见疾病，它可分为急性和慢性咽炎。中医称之为“喉癖”。特别是慢性咽炎，其病程长，病因复杂，症状时轻时重，不易治愈[1]。清咽利喉颗粒是以金银花、苦杏仁、桔梗及甘草为主要原料经加水提取、浓缩、干燥制成的保健食品。目前对以上4种中药配伍后具有清咽功能的研究未见报道。因此，根据国食药监保化［2012］107号文件中清咽功能动物试验的相关要求，从大鼠肉芽肿、大鼠足趾肿胀率、小鼠耳肿胀3个方面研究清咽利喉颗粒对大、小鼠清咽功能的影响，来证明该产品是否具有清咽功能。
1材料与方法
1.1受试物：清咽利喉颗粒，其主要原料为金银花、苦杏仁、桔梗及甘草（配比为4：3:2:1），规格为5g/袋，样品置密封阴凉干燥处，供试验备用。人体推荐摄入量为15g/人/日，折合到其原料日服用量共为10g/人。
1.2实验动物：选用上海西普尔－必凯实验动物有限公司繁殖的SPF级SD健康雄性大鼠80只、SPF级BALB/C健康雄性小鼠40只， 生产许可证号SCXK(沪)2008－0016，合格证编号2008001634293、2008001634294。大鼠各平行试验组初始体重范围为157～180 g，小鼠各平行试验组初始体重范围为19.7～21.9g。试验动物在温度为20～25℃、相对湿度为40%～70%的本中心屏障系统中饲养。试验动物使用许可证号 SYXK(苏)2012－0041。辐照灭菌饲料由苏州双狮实验动物饲料科技有限公司提供， 批准文号苏饲审(2009)05032。
1.3 剂量选择与受试物给予方式：受试样品的人体推荐剂量为15g/人/日 (按60kg体重计)，设低、中、高三个剂量组即1.25g/kg·bw/d、2.5g/kg·bw/d、5g/kg·bw/d，分别相当于人体推荐摄入量5倍、10倍、20倍，另设0g/kg·bw/d组以无菌水代替受试物。受试样品经粉碎后用无菌水配制，低、中、高剂量配制浓度分别为125mg/mL、250mg/mL、500mg/mL，按1.0mL/100g·bw灌胃。经口每日一次给予大、小鼠相应浓度的受试样品，连续灌胃32d后进行指标测定。
1.4 主要仪器与试剂：T-1000型电子天平、JA2003型电子天平、恒温干燥箱、脱毛器、足趾容积测量仪、打孔器。乙醚、碘伏、葡聚糖4万、无菌蒸馏水、二甲苯。
1.5 试验方法：根据国食药监保化［2012］ 107 号文件中清咽功能。大鼠适应环境 3 d， 按体重随机分为Ⅰ、Ⅱ2 个大组，每个大组分为 4 个剂量组， 每个剂量组 10 只大鼠;按各剂量连续给样32d后，Ⅰ组大鼠进行棉球植入试验，Ⅱ组大鼠进行足趾肿胀试验。小鼠适应环境3d， 按体重随机分为4个剂量组， 每个剂量组10只小鼠;按各剂量连续给样32 d 后， 进行小鼠耳肿胀试验。
1.6试验数据统计：用SPSS统计软件对实验数据进行统计处理。计量资料采用方差分析，需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，满足方差齐要求的数据，用多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
2结果与分析
2.1对大、小鼠体重的影响
各剂量组大、小鼠的初始体重与0g/kg·bw/d组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。大、小鼠的初始体重在各组间较为均衡。经口给予大、小鼠不同剂量的清咽利喉颗粒一个月后，各剂量组大、小鼠体重增长值进行方差齐性检验，满足方差齐的要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。结果可见三个剂量组大、小鼠体重增长值与0g/kg·bw/d组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
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2.2对大鼠肉芽肿形成的影响
经口给予大鼠不同剂量的清咽利喉颗粒30天后，对肉芽肿净量进行方差齐性检验，满足方差齐要求，用单因素方差分析方法中多个试验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表3可见，三个剂量组肉芽肿净量低于0g/kg·bw/d组，差异有统计学意义（P<0.05）。
表3 对大鼠肉芽肿形成的影响()
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2.3 对大鼠足趾肿胀情况的影响
经口给予大鼠不同剂量的清咽利喉颗粒一个月后，测量各组大鼠右后足趾的容积，根据不同时点所测量的容积计算相应的足趾肿胀率。将肿胀率进行方差齐性检验， 2h肿胀率不满足方差齐性要求，要秩和检验进行统计处理，1h、4h和6h肿胀率满足方差齐要求，用单因素方差分析方法中多个试验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表4可见，1.25g/kg·bw/d剂量组大鼠2h足趾肿胀率低于0g/kg·bw/d组，2.5g/kg·bw/d、5g/kg·bw/d剂量组大鼠2、4h足趾肿胀率低于0g/kg·bw/d组，5g/kg·bw/d剂量组大鼠6h足趾肿胀率低于0g/kg·bw/d组，差异有统计学意义（P<0.05）。
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2.4 对小鼠耳肿胀实验的影响
经口给予小鼠不同剂量的清咽利喉颗粒一个月后，以二甲苯刺激小鼠右耳后，打下左右两耳片称重，以两耳差为耳廓肿胀值，计算耳廓肿胀率，将耳廓肿胀率进行方差齐性检验，满足方差齐性要求，用单因素方差分析方法中多个试验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表5可见，5g/kg·bw/d剂量组耳廓肿胀率低于0g/kg·bw/d组，差异有统计学意义（P<0.05）。
表5 对小鼠耳肿胀情况的影响()
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3 小结
3.1大鼠棉球植入实验：三个剂量组大鼠肉芽肿净量低于0g/kg·bw/d组，差异有统计学意义（P<0.05）。此项实验结果阳性。
3.2大鼠足趾肿胀实验：1.25g/kg·bw/d剂量组大鼠2h足趾肿胀率低于0g/kg·bw/d组，2.5g/kg·bw/d、5g/kg·bw/d剂量组大鼠2、4h足趾肿胀率低于0g/kg·bw/d组，5g/kg·bw/d剂量组大鼠6h足趾肿胀率低于0g/kg·bw/d组，差异有统计学意义（P<0.05）。此项实验结果阳性。
3.3小鼠耳肿胀实验：5g/kg·bw/d剂量组耳廓肿胀率低于0g/kg·bw/d组，差异有统计学意义（P<0.05）。此项实验结果阳性。
根据国食药监保化[2012]107号中清咽功能评价方法的结果判定，在本试验条件下清咽利喉颗粒具有清咽功能。
参考文献：
[1］周凝，刘彦臣，张贵君．咽炎的中医论治及进展．中医药学报，1999,13(2):63．
[2] 华海清，宋起，李益生.现代养生保健中药辞典[M].北京人民卫生出版社，2002：590-591 .