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摘要：在高效液相色谱技术是色谱法的一个重要分支，其在实际应用中以液体为流动相，其与单独的任何一种色谱检测技术相比，有着快速和准确的优点。当前，高效液相色谱技术与质谱分析方法也得到了高度融合，产生了高效液相色谱 - 质谱联用技术，其在有机化学领域得到了重要应用，进而为药物分析工作提供了有力支持。
关键词：液相色谱；联用技术；药物分析
引言：近年来，在药物质量研究过程中，对杂质的研究越来越重视，这一研究贯穿于药物研发的整个过程。药物中的某些杂质与药物临床使用中产生的不良反应存在密切关系，是影响药物安全有效的重要因素。药物中的杂质可分为有机杂质、无机杂质、残留溶剂，其中有机杂质包括起始原料、工艺中间体、化学反应副产物、化学试剂及贮藏运输过程中产生的降解产物等物质，这类杂质通常被称为有关物质。因药物中有关物质的含量微小，检查时必须选择专属性强、灵敏度高的检测方法。本文综述了药物中有关物质检测方法研究进展及应用。
1高效液相色谱法（HPLC）概述
HPLC 法具有灵敏、快捷、准确的优势，是目前测定药物中有关物质最常用的方法之一，广泛被各国药典采用。根据待测物质结构，可以选择不同分离原理的色谱类型。应用 HPLC 法测定药物中有关物质常用的方法主要有四种：外标法、加校正因子的主成分自身对照法、不加校正因子的主成分自身对照法及面积归一化法。其中，前三种应用最为广泛。在 2015 版《中国药典》中，对尼莫地平片、加巴喷丁片等有关物质检测均采用外标法与不加校正因子的主成分自身对照法。部分研究人员采用反相 HPLC 法以加校正因子的主成分自身对照法测定双氯芬酸钠有关物质。
2 在药物分析和鉴定中的应用
药物结构不止包括药物中的有效成分，也包括药物中杂质成分的化学结构。这种结构鉴定相对复杂，对技术水平有着很高的要求。为此，高效液相色谱 -质谱联用技术就得到了应用，其应用在药物结构鉴定中具有非常重要的现实意义。
2.1 在化学药品分析中的应用
为了防止内源物质对检测结果进行干扰，有研究人员使用高效液相色谱 - 质谱联用技术，对大鼠血浆中的埃索美拉唑含量进行检测。通过对大量检测结果进行拟合分析，发现测定结果与变量之间存在线性关系，且拟合度良好，r2=0.999 7。从分析结果来看，大鼠血浆中埃索美拉唑的质量浓度范围在 0.2~20 ng/mL，且无论质量浓度如何，都具有较高的回收率，回收率超过 90%。
2.2 在药物代谢动力学分析中的应用
药物代谢动力学分析是指对药物在机体内所发挥的作用进行定量分析。具体来看，当前，药物代谢动力学分析的应用范围已经拓展到了药物体内反应过程方面，并对不同药物成分之间的相互作用也进行了一定的研究。
如以苦参碱和氧化苦参碱为对象，研究了氧化苦参碱在大鼠体内的主要代谢产物，健康大鼠腹腔肌注 40 mg/ kg 氧化苦参碱，收集 0~24 h 的尿样，尿样中的代谢物经 C18 小柱进行富集与纯化后，分析结果表示，在大鼠尿样中有原药及其 6 种Ⅰ相氧化及还原代谢产物，其中苦参碱为主要代谢产物，未检出Ⅱ相代谢物。由此可见，对于一些较为复杂的中药药方或中成药制剂而言，这种分析方法也有着重要作用，而为了更好地分析这些内容，就必须使用高效液相色谱 - 质谱联用技术进行分析。
2.3 在中药活性鉴定中的应用
中药活性鉴定过程中通常只使用较少的药量，为此，必须使用高效液相色谱 - 质谱联用仪器对其进行检测，检测过程中，主要检测的内容是样品的保留时间、紫外吸收光谱和质谱中的分子离子峰，以及具有特征性的碎片峰。在得到检测结果后，只需要将其与标准化合物的数据进行对照，就可以准确鉴别出中药内活性成分的化学结构。研究人员利用这种方法，对玫瑰花抗炎活性成分进行研究，确定了玫瑰花中含有的没食子酸、4-O- 没食子酰基奎宁酸、没食子酸甲酯等数种有效活性成分在抗炎症中可能起到重要作用，也为玫瑰花成分的进一步应用提供了有效参考。
另有研究人员对中药材五味子进行了体外抑菌方面的分析研究，根据质谱分析，初步鉴定出其中的奎尼酸、苹果酸及其异构体、柠檬酸、咖啡酰奎尼酸、莽草酸等十余种化合物可能对抑菌有作用，并进一步对五味子的抑菌活性部位进行了测定，为开发天然无污染的抑菌药品提供了研究思路。实际上，很多中药材中，起到某种功能的有效成分往往并非单一组分，而是由多种化合物共同发挥作用。为此，必须明确这些化合物具体的分子结构和理化性质，从而对药物有效成分的药效学和药动学进行进一步研究。基于此，有研究人员从银黄颗粒活性成分的分析工作入手，开展了相关研究，通过一系列定性和定量分析后发现，银黄颗粒中含有 14 种可能有效的成分，这其中又有 12 种化合物的保留时间、相对分子质量和质谱信息已经得到精准确定。由此可见，这种分析方法对快速准确地分析药物有效成分以及对药品质量的评价和控制都有着重要的作用。
结语：高效液相色谱 - 质谱联用技术具有高灵敏度、高效率和高精确度等诸多优点，是促进现代药物研究与发展的有力支撑。为此，相关研究人员也要用好这一先进的技术，要在现有技术的基础上，不断研究创新，积极扩大这项技术的研究领域和适用范围。
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