【摘 要】：目的：讨论并分析三种不同检验方法（细菌培养法、PCR检验法和革兰染色法）检验阴道细菌的临床效果差异。方法：研究对象为在我院检验科进行阴道检查的94例患者，对其阴道分泌物进行采集后分别采用上述三种检验方法进行检查，并对比分析三种方法的阴道细菌检出率。结果：细菌培养法、PCR检验法和革兰染色法对患者阴道细菌的检出率分别为80.85%（76/94）、78.72%（74/94）、45.74%（43/94），细菌培养法和PCR检验法的检出率均显著高于革兰染色法（P<0.05），同时PCR检验法与细菌培养法（金标准）的检出率差异不具有统计学差异（P>0.05）。结论：PCR检验法对阴道细菌的检出效能与金标准细菌培养法无显著差异，均高于革兰染色法;同时PCR检验法比细菌培养法操作简单，获得结果快速;故而值得被广泛应用。
【关键词】：检验方法;阴道细菌;检出率
Abstract: Objective: to discuss and analyze the clinical effect of three different methods (bacterial culture method, PCR method and Gram staining method) for vaginal bacteria. Methods: 94 cases of vaginal examination in our hospital were studied. The vaginal secretions were collected and examined by the above three methods respectively, and the detection rate of the three methods was compared and analyzed. Results: the detection rates of bacterial culture, PCR and Gram staining were 80.85% (76 / 94), 78.72% (74 / 94) and 45.74% (43 / 94), respectively. The detection rates of bacterial culture and PCR were significantly higher than that of Gram staining (P < 0.05). Meanwhile, there was no significant difference between PCR and bacterial culture (gold standard) (P > 0.05) ）。 Conclusion: there is no significant difference between the detection efficiency of PCR method and that of gold standard bacterial culture method, both of which are higher than that of Gram staining method. At the same time, PCR method is simpler than bacterial culture method, and the results are faster. Therefore, it is worth being widely used.
[Key words]: test method; vagina bacteria; detection rate
阴道炎是一组因阴道和菌群之间平衡失调导致的外阴瘙痒、刺激、灼痛以及异常流液的病症，其常见种类包括细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等[1]。该病在妇女中十分常见，若其未得到及时诊断和治疗，容易引起急慢性盆腔炎甚至导致异位妊娠或者不孕[2]。临床上对于该病的诊断，主要是进行阴道细菌的检查，常见方法包括细菌培养法、PCR检验法和革兰染色法三种，其各有优缺点[3]。本文欲探究这几种方法的具体诊断效益，具体研究流程如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择在我院检验科接受检查的94例阴道炎患者作为研究对象，其年龄范围为23-47岁，平均年龄为（38.45±6.21）岁，其均存在阴道瘙痒、大量白带分泌物等症状。
1.2 研究方法
嘱患者呈截石位，将阴道镜置入患者宫颈内，采用无菌棉拭子在其阴道后穹窿处蘸取阴道内的分泌物，然后将带有分泌物的棉拭子放入生理盐水试管中。
（1）细菌培养法：在无菌条件下将试管内的阴道分泌物以无菌接种环接种至用于细菌分离的培养基（生产公司：上海科兴生物科技有限公司）上，然后将其放至35℃的二氧化碳培养箱中，48h后选取培养基中呈光滑、半透明水滴状的菌落进行生化检验。
（2）PCR检验法：在生理盐水中加入500?L的阴道分泌物，在12000r/min的离心机内离心10min，将上清液去除并加入碱性裂解液，在98℃环境中进行10min的加热，然后同样转速离心5min，取上清液进行DNA模板制作。需要制作含有阴道分泌物DNA模板的阳性组和没有DNA模板的陰性组进行对比。进行PCR产物及扩增检查时，需取25L总体积的模板、无菌离子水、缓冲液以及引物，并将30?L的无菌石蜡油盖在上面，然后进行PCR循环，循环参数为1min的58℃、1min的72℃、1min的94℃和5min的95℃，32个循环后再72℃环境中延伸5min[4]。
（3）革兰染色法：将无破损清洁玻片放入95%乙醇中进行浸泡，一段时间后取出并擦拭晾干，在玻片中央涂布无菌生理盐水中的阴道分泌物，然后将其在显微镜（品牌：奥林巴斯;型号：BX46）下进行细菌检查。
1.3 判断指标
对阴道分泌物中的细菌种类、数量进行观察统计，用检出率来对比分析三种方法的检验效果。
1.4 统计学处理
采用SPSS25.0统计分析软件进行数据分析，采用χ2检验对比分析三种检验方法的检出率差异，当P<0.05时表示差异具有统计学意义。
2 结果
细菌培养法、PCR检验法和革兰染色法对患者阴道细菌的检出率分别为80.85%（76/94）、78.72%（74/94）、45.74%（43/94），细菌培养法和PCR检验法的检出率均显著高于革兰染色法（P<0.05），同时PCR检验法与细菌培养法（金标准）的检出率差异不具有统计学差异（P>0.05）。
3 讨论
阴道炎患者主要是因阴道内乳酸杆菌减少引起，故而会出现其他病原菌含量的上升。阴道细菌检验是对阴道炎进行诊断的主要手段，常见的检查方法包括革兰染色法、细菌培养法和PCR检验法【3】。其中革兰染色法操作简便，但假阴性结果高，容易出现漏诊，耽误患者疾病的诊断和治疗;细菌培养法是金标准，但其检验过程复杂且耗时，无法及时出结果;PCR检验法敏感性高，操作流程较简单，同时出结果迅速【4】。本研究对此三种方法的检验效果进行了对比分析，其结果为： 细菌培养法、PCR检验法和革兰染色法对患者阴道细菌的检出率分别为80.85%（76/94）、78.72%（74/94）、45.74%（43/94），细菌培养法和PCR检验法的检出率均显著高于革兰染色法（P<0.05），同时PCR检验法与细菌培养法（金标准）的检出率差异不具有统计学差异（P>0.05）。该结果表明，PCR检验法对阴道细菌的检出效能与金标准细菌培养法无显著差异，均高于革兰染色法;同时PCR检验法比细菌培养法操作简单，获得结果快速;故而值得被广泛应用。
参考文献
【1】郭元元， 杨双双. 1830例女性阴道炎患者阴道微生态调查[J]. 中国微生态学杂志， 2019（3）： 339-343.
【2】陈英. 妇产科临床治疗阴道炎的效果[J]. 中国社区医师，2018（18）：88-88.
【3】张瑞菊[1]. 妇科阴道炎临床诊断及治疗效果观察[J]. 中国社区医师， 2018（20）：94-95.
【4】张亚梅. PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的结果[J]. 2017， 4（1）： 255.