林一平
（福建科胜司法鉴定所 福建 莆田 351100）
关键词：法医遗传学；亲子鉴定；多步突变；STR
1案例
1.1案情
因户口申报需要，一男子（假设父）携带一自称为其女儿的孩子来本鉴定所要求进行亲子鉴定。本鉴定所采集两位被鉴定人指尖血备检。
1.2检验过程
采用MicroreaderTM 21 Direct ID System（苏州阅微基因技术有限公司）进行复合扩增，发现D12S391基因座不符合孟德尔遗传规律，随后采用PowerPlex21 System试剂盒（Promega公司）对20个STR基因座进行了检验。同时采用MicroreaderTM 23sp-D ID System试剂盒（苏州阅微基因技术有限公司）对常染色体STR基因座加测到39个位点，Goldeneye17X（基点认知技术有限公司）对X染色体上17个STR基因座进行复核扩增，又发现D21S1270基因座不符合孟德尔遗传规律。
1.3检验结果
在D12S391基因座，假设父的基因型为“17”，孩子的基因型为“20”，存在多步突变的可能。在D21S1270基因座假设父的基因型为“11，14”，孩子的基因型为“10，12”，为较常见的一步突变。39个常染色体STR基因座的累计亲权指数CPI为2.1249×1011（注：大于10000)，亲子关系相对机会RCP大于99.99%。常染色体STR基因座分型结果如（表1）显示。
表1 常染色体STR基因座分型结果
对本案假设父和孩子X染色体上17个STR基因座进行复核扩增，X-STR基因座分型结果数据显出：孩子在17个X-STR基因座中的每个基因座都有一个等位基因与假设父相同。由于X染色体特有的遗传方式: 男性的X染色体只有一条，只能遗传给女儿。所以父女的亲权鉴定用 X-STR 比常染色体 STR 更有效［1］ 。故这一案例在39个常染色体基因座基础上增加检测 X-STR 基因座。
1.4鉴定结论
在排除同卵多胞胎、近亲及外源干扰的前提下，支持假设父为孩子的生物学父亲。
2讨论
STR目前在亲子鉴定中被广泛应用。STR的高突变率使得亲生父（母）与孩子之间会出现不符合遗传规律的情况。[2]据李秋阳[3]调查统计，父源性突变率远高于母源性。在实践中，亲子鉴定STR发生突变的现象是普遍存在的，STR 突变是逐步突变的，即每次突变只改变一个重复单位，两个或更多个重复单位的变化是在前一次突变基础上发生的，也就是多步突变是逐步形成的。最终突变都表现为增加或减少一个或几个重复单位。90% 以上的 STR 突变均为增加或减少一个重复单位，即一步突变。二步突变者少于10% ，更多步突变的比例更少 [4]。本案例中这对父女出现2个STR基因座突变，且一个是三步突变。查阅文献发现，亲子鉴定中同时存在 2 个STR基因座且有三步以上突变的只有报道过一例[5]。
经询问该男子的妻子失联13年多，男子的直系男性亲属只有一个父亲，因怀疑该孩子是否有可能与男子的直系男性亲属存在亲生血缘关系，经本所鉴定人采该男子的父亲（孩子的爷爷）指尖血备验。 发现20个STR基因座该男子的父亲与孩子有6个基因座不符合孟德尔遗传规律，累积亲权指数CPI小于0.0001，RCP小于0.01%。排除该男子的父亲为孩子的生物学父亲。
本案例采用常规亲子鉴定案件使用的20个STR基因座复核扩增体系进行检测时,发现D12S391基因座违反孟德尔遗传规律，增加检测19个STR基因座的分型，发现D21S1270基因座违反孟德尔遗传规律，检测假设父和孩子X-STR基因座，孩子的每个X-STR基因座上的等位基因都有一个与假设父相同。计算常染色体的CPI和RCP，已超过亲权认定的标准。在日常实践中，如果遇到多步突变的应换一种检测试剂盒验证分型是否正确，遇到可疑的需要检验性染色 STR 来辅助。对于发生于父亲和儿子之间的突变可以用 Y-STR 来验证，而对于某些父亲与女儿或母亲与孩子的鉴定可依靠检测X-STR或二代测序来完成。本案采用检测16个X-STR基因座，可为解决突变案例提供辅助手段。二联体亲子鉴定遇到2-3个STR突变的可以考虑直系亲属做排除验证。在本案中假设父的父亲是假设父唯一的男性直系亲属，经常染色体20个STR基因座检测结果与孩子为排除关系。提高鉴定结果的准确性。
参考文献：
[1] Szibor R． X-chromosomal markers: Past，present and future［J］． Forensic Sci Int( Genet) ，2007，1( 2) : 93-99．
[2] Brinkmann B ， Klintschar M ， Neuhuber F ， et al. Mu-tation rate in human microsatellites ： influence of the structure and length of the tandem repeat [J]. Am J Hum Genet ， 1998 ， 62 （ 6 ）： 1408-1415.
[3]李秋阳，丰伟军，杨庆恩，等。常用STR基因座突变的观察与分析[J]。法医学杂志，2005,21（2）:86-89
[4] 吕德坚，陆惠玲 . 亲子鉴定 STR 突变的考虑 [J]. 中国司法鉴定， 2009 ， 45 （ 4 ）： 43-45.
[5]张陈明，陶 胜. 亲子鉴定中 STR 基因座可疑多步突变 2 例 [J]. 法医学杂志，2017,33(4):451-452