肺癌的发病率和死亡率在我国均已居恶性肿瘤首位，目前临床诊断的肺癌有3/4患者已经失去手术机会，而早期肺癌的5年生存率可达60-90%[1]。所以，肺癌的筛查、早诊断、早发现与治疗对于提高患者存活率具有现实意义。肺癌的诊断方法很多[2]，其中应用较广泛的还是痰液的细胞学诊断。痰脱落细胞学涂片检查是病理细胞学中唯一一种无创的检查方法之一，并且是肺癌患者筛查和诊断最简单、最经济、最能接受的手段。但涂片方法受到多种因素影响，阳性率低，分类困难，给诊断带来不少困扰。近年来，笔者在实践中摸索出一种简易痰液石蜡包埋切片法，方便快捷，效果良好。结合传统涂片检查，取得了较满意的效果。
1 材料和方法
1．1 材料 回顾性研究近年来我院病理科所做的痰脱落细胞学检查150例。要求痰液的质量必须重视两个环节：一是必须是从肺部咯出；二是痰必须新鲜。
1．2 方法 患者咯出痰后立即送检，常规涂片后剩余标本加上95%乙醇固定。将固定成棉絮块状痰液用擦镜纸包裹置于包埋盒内。放入40%甲醛和95％乙醇混合液内固定后按常规脱水、石蜡包埋、切片、HE染色及免疫组化染色。显微镜下阅片诊断。
2 结果
切片后HE染色镜下见细胞集中，密度高，厚薄均匀，能清楚的观察细胞的排列方式，形态更接近组织学切片，可出现明显的组织学结构；细胞形态保存良好，结构清晰，核浆对比突出，无重叠、皱缩或变性，染色效果鲜艳，对比度良好。解决了痰涂片存在的固定不及时细胞的退变、涂抹时厚薄不均，细胞着色欠佳．致细胞结构模糊不清等现象。免疫组化染色阳性信号定位准确，对比清晰。
3 讨论
经本法制成的痰液切片的优点是厚薄均匀,细胞不易拥挤重叠，染色效果鲜艳，对比度良好，易于辨认细胞成分。更重要是易于观察肿瘤的组织结构。组织结构的出现为病理医生诊断提供了强有力的依据，使诊断结果更加可靠。肿瘤细胞在向气管腔脱落时，既有单个的又有成团的，成团的细胞往往具有肿瘤的组织形态。
在取材、制片过程中痰切片能够很好地保存肿瘤的组织结构，避免了涂片在推片时对组织结构的破坏。痰液的肿瘤组织学类型较单一，主要是鳞癌、腺癌和小细胞未分化癌，各自的特点也较明显[3]，结合免疫组化染色结果容易分类。
痰液涂片和切片联合检查有许多优点。涂片检查简便、快捷、观察的范围比切片广。痰石蜡包埋切片技术实际上就是组织学制片技术在细胞学中的应用，标本经过脱水、加温浸蜡，细胞收缩，体积较涂片略小，细胞形态与组织切片的细胞相似，与涂片结合起来观察能达到优势互补的效果。蜡块可以长期保存并反复、连续切片，进行后续各种病理检测，如特殊染色和免疫组化染色、分子病理检测等，不仅可以定性诊断，还可以追踪癌细胞来源、分型、临床分期、评估预后、复发等[4]，还可以检测癌细胞对化疗药物的耐药物性和敏感性，以及检测癌细胞分子靶向治疗基因突变位点；使患者可免于纤维支气管镜检等小块括检，特别是一些年龄大拒绝手术的患者和一些已经失去手术机会的患者，可通过痰检石蜡切片阳性进行更进一步的免疫组化和分子病理等检测，来达到肺癌的诊断、鉴别诊断、指导临床合理选用化疗药物和选择分子靶向治疗药物的目的。
总之，痰石蜡包埋切片和传统涂片联合检查可明显提高肿瘤脱落细胞学检查的阳性率和准确性，为后续各种病理学检查提供了方便，缩短了肿瘤细胞学与组织病理学的差距，提高了其应用价值。所以本方法的痰石蜡包埋切片可与传统涂片一起作为痰细胞病理学检查的常规，值得在基层医院病理科推广应用，也可适用大中医院直接借蜡块进行定性检查及科研。
参考文献
[1] 林淑端，郭智俊，陈石桥，等. 痰脱落细胞涂片结合TCT及痰沉渣琼脂石蜡双包埋切片在肺癌高危人群筛查中的应用[J] .国际医药卫生导报，2017，23（16）：2542-2545.
[2] 中国肺癌防治联盟，中华医学会呼吸病学分会肺癌学组，中国医师协会呼吸医师分会，等. 肺癌筛查与管理中国专家共识[J] .国际呼吸杂志，2019，39（21）：1604-1615.
[3] 刘梦海，梁忠泉，袁昌隆，等. 痰液和胸腹水沉积物切片在肿瘤脱落细胞学中的作用[J] .临床与实验病理学杂志，2003，19（4）：409-412.
[4] 虞红珍，吴强.浆膜腔积液细胞学检查中制片技术应用的现状与进展[J] .临床与实验病理学杂志，2014，30（4）：434-436.
作者单位：中国人民解放军96605部队医院，吉林通化 134001
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通信作者：周俊才，病理科主任、副主任医师
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