核酸检测&抗体检测,有啥区别

发表时间:2021/3/22   来源:《医师在线》2020年10月19期   作者:   李亚锋
[导读] 核酸检测&抗体检测,有啥区别


   李亚锋
(乐山市中医医院;四川乐山614000)
   核酸检测就是指核酸检测法,其检测的物质是病毒的核酸。核酸检测就是在人体的呼吸道标本、血液以及粪便中寻在是否存在外来入侵的病毒核酸,以病毒的核酸来判断检测者是否被新冠病毒感染。如果检查表示病毒核酸呈阳性即可证明该检测者体内存在新冠病毒。

一、认识核酸检测
   1.核酸检测的原理
   就目前的科学研究范围显示在已知的生物中除了朊病毒之外其他所有的生物都具有核酸。核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)以及核糖核酸(RNA)。新型冠状病毒是一种仅仅含有核糖核酸的病毒,病毒中的核酸都有其特殊的排列,因此核酸检测就是通过对病毒特殊的核酸序列排列的辨别来区分是哪种病毒。2019年年底爆发新冠疫情后,国内医学人士快速做出了反应,一些研究人员采集了新冠病毒的标本,对这一病毒的核酸序列进行了解析,将所得结果和其他基因进行比较,找出了新冠病毒核酸序列的不同之处,正是根据这一不同之处,来判断病人是否患有新冠,也就是说,对病人进行检测,发现该病人体内核酸序列具有新冠病毒特点,即可判断该患者患上新冠疾病。
   2.新型冠状病毒核酸检测
   检测新型冠状病毒的特殊核酸序列常用的方法是荧光定量PCR(聚合酶链式反应)。但是聚合酶链式反应的对象模版是脱氧核糖核酸,新型冠状病毒的遗传物质为核糖核酸,因此在进行聚合酶链式反应反应之前,需要将核糖核酸转录为脱氧核糖核酸。如果探针完整也就是检测者体重不存在目标特殊核酸序列,那么报告荧光基团就会被淬灭荧光基团吸收,不现实荧光信号。如果反应体系中存在目标序列,那么聚合酶链式反应使探针就会与目标模版结合,之后在DNA外切酶的作用下报告荧光基团和淬灭荧光基团会分离,从而发出荧光信号。DNA链新增了一条,就会新出现一个荧光分子。荧光分子的数量可以借助于PCR仪来进行监测,一旦这一数量达到预先设定的值,则会出现相应的提示,并做相应的记录,这里采用循环数(Ct值)进行记录,这一循环数(Ct值)和病毒核酸的浓度存在一定的联系,若病毒核酸浓度偏低,那么循环数(Ct值)就会偏大。
   3.新型冠状病毒的核酸检测流程
   对于新冠病毒来说,对其进行核酸检验时,其主要流程为:取样——送检——核酸检测。这里对其流程做了简要讲解,其内容如下:
   (1)取样。取样就是选取检测的样本,新冠病毒检测常用的样本主要有痰液、鼻拭子、咽拭子、肺泡灌洗液、支气管灌洗液等,当然,在取样的过程中,需要做好防污染措施,避免样本被其他物质污染,以免影响检测的准确性。
   (2)送检。采集好的样本需要尽快送往实验室检验,如果无法立马送往检验需要按照说明书进行低温保存,之后送往专门检验的机构进行核酸检测。当然了,在送检这一环节中,应做好样本的保护措施,控制好样本存储环境,例如样本所处环境温度等。
   (3)核酸检测。RNA核酸检测需要将RNA转录为cDNA后再进行扩增检测。聚合酶链式反应的扩增和检测需要使用产品说明书中指定的荧光定量PCR仪,通过荧光定量PCR仪可以获取样本的Ct值,根据Ct值的大小判断样本中是否含有病毒。
二、认识抗体检测
   在人体免疫应答的过程中,主要涉及两个方面的免疫应答,一个是体液免疫另一个是细胞免疫,这两个免疫应答是相互配合、相互协调的一个过程。在实际应用中,这两个方面的检测方法多样,体液免疫检测使用得相对较多。
   在某些感染性病毒中往往采用双份血清法,也就是患者发病初期以后发病后某个阶段坑体增长的情况,两者进行对比检验。一般的临床上很多感染性疾病的初期,机体内先产生lgM型抗体,之后才产生lgG抗体,因此在条件允许的情况下,有检测试剂盒提供时,尽可能在疾病的初期进行lgM的抗体检测有助于临床疾病的诊断。
   呼吸、心血管、泌尿、神经等等一些列疾病的发生均与自身免疫之间存在密切的关系,都可以检测到相应的抗体比如胰岛素依赖型糖尿病与胰岛细胞抗体等等。因此,对于自身抗体的检测对于很多疾病的发病机理、临床诊断都是有非常重大的意义。
三、抗体检测和核酸检测的区别
   (1)样本不同。核酸检测可以对病毒进行直接的检测,主要通过呼吸道、鼻咽部分泌物以及痰液、支气管等进行样本的取样,对样本进行检测,通过病毒的特殊基因序列判断该检测者体内是否存在该病毒。核酸样本的保存条件苛刻,RNA很容易分解,因此在4摄氏度的条件下进行存放24小时。而抗体检测是一种病毒的间接检测方式,可以说成验血检测,通过对血液中有病原体产生的抗体来判断。采取的样本可以常温存放72小时。
   (2)检测条件不同。对于核酸检测来说,其要求比较高,一方面需要有相关的仪器设备以及实验室,另一方面还需要有专业的人员,这两个方面大大提高了核酸检测的难度,其检测门槛较高,普及难度较大。而抗体检测在这两方面的要求相对宽松,对检测场所、检测工作人员的个人技能等的要求相对较低,在基层实验室内就可以进行,这为检测的普及提供了可能,能够进行大量检测。
   (3)所用方法和原料不同。对于核酸检测来说,现阶段所用的的技术为荧光定量PCR技术,其原料主要有DTT、BSA、Tris等。对于抗体检测来说,一般检测方法有化学发光法、酶联免疫法等,检测过程中用到的原料主要有BCIP、TMB等。

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