【摘要】目的：探讨T7肽增强5-氟尿嘧啶抑制肿瘤生长的机制。方法：1．建立HepG2肝癌裸鼠移植瘤模型，随机分为对照组，5-FU(20 mg/kg)组，联合组（T7肽+5-FU）每组10只,连续干预19天,计算抑瘤率。2.采用免疫组织化学SP法检测各组肿瘤组织HIF-1α、VEGF-A蛋白水平表达。结果：联合组、5-FU组与对照组相比，肿瘤的生长明显抑制（P<0.05），两个给药组IR分别为65.4%和49.4%。与对照组相比，联合组明显下调HIF-1α、VEGF-A蛋白的表达（P<0.05）。结论：T7肽可增强5-氟尿嘧啶抑制肝癌移植瘤的生长，其机制可能与抑制肿瘤微环境中HIF-1α、VEGF-A蛋白的表达有关。
【关键词】T7肽；血管生成；缺氧诱导因子-1α；血管内皮生长因子-A
5-氟尿嘧啶（5-fluoroura-cil，5-FU）在临床上用于治疗消化道肿瘤、卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌和肺癌等恶性疾病 [1]。T7肽源于全长Tumstatin内的74～98氨基酸残基序列，且具有与全长的Tumstatin相同的抗血管生成活性[2-3]。本实验通过探讨T7肽联合5-Fu对裸鼠肝癌移植瘤生长的影响，为其临床应用提供实验依据。
1方法
1.1细胞培养
HepG2肝癌细胞置于DMEM高糖基础培养液中，并添加10％胎牛血清(FBS)、1％青、链霉素混合液。取对数生长期HepG2细胞，经消化、离心收集后，悬浮于无血清RPMI1640培养基，调整到细胞密度2*107ml,取2只裸鼠于腋部皮下接种，裸鼠随机分为对照组、5-FU组，联合组，每组10只。对照组每天腹腔注射生理盐水，0.2ml/只。5-FU组每隔2天腹腔注射5-FU剂量为20 mg/kg，联合组腹腔给予注射合成的T7肽(4.4mg/kg/d)，并每隔2天腹腔注射5-FU剂量为20 mg/kg。给药19天后处死裸鼠取出瘤体。
1.2统计学方法
采用SPSS 17.0软件，所有计量数据均以x±s表示。组间数据比较采用One-way ANOVA两两比较法，P <0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1对肿瘤生长的影响
联合组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比，给药组肿瘤体积缩小（P<0.05），IR分别为49.4%、65.4%。
2.2免疫组化SP法检测结果
免疫组织化学染色结果显示， VEGF-A表达于细胞质或细胞膜，HIF-1α表达于细胞核和细胞质中，与对照组相比，5-FU组和联合组中HIF-1α和VEGF-A的蛋白表达均降低（P<0.01）。
3讨论
大量研究证实，68％的人类常见恶性肿瘤（胰腺癌、胃癌、食管癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌等）和癌前病变中均有HIF-1α蛋白的高表达[4-5]，而在其相应的正常组织和良性肿瘤中表达并不增加。An等[6]发现，VEGF在HCC组织、肝细胞及血管内皮细胞均有表达；VEGF在癌组织中的表达比癌旁组织高约7倍。研究表明[7]，VEGF的表达与组织中微血管密度及新生血管的数量有密切关系。
【参考文献】
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