气相色谱法测定清火片中薄荷脑的含量

发表时间:2019/5/7   来源:《药物与人》2019年1月   作者:邱冬梅 马静 李莹莹 沈亚娣 王小月 蔡仙 李娟
[导读] 探讨气相色谱法测定清火片中薄荷脑含量的可行性。

健民集团叶开泰国药 邱冬梅 马静 李莹莹 沈亚娣 王小月 蔡仙 李娟

        【摘要】目的 探讨气相色谱法测定清火片中薄荷脑含量的可行性。方法 采用聚乙二醇毛细血管柱,程序升温,FID检测器,进样口220℃,检测器250℃,萘为内标,按内标法计算含量。结果 薄荷脑浓度在0.0121—0.6045mg/ml范围内线性关系良好,回收率99.6%,RSD为1.72%。薄荷脑平均含量为0.36mg/片。结论 该方法测定薄荷脑的含量操作简便、结果准确可靠,可作为清火片中薄荷脑含量测定方法。
        【关键词】气相色谱法;清火片;薄荷脑

        [中图分类号]R286.0 [文献标识码]A [文章编号]1439-3768-(2019)-01-YS

        清火片是由大黄、石膏、薄荷脑制成的片剂,收载于国家食品药品监督管理总局国药药品标准中。该药品中所含薄荷脑为一活性成分,可以对皮肤黏膜产生清凉感以减轻不适及疼痛。但该药品的质量标准中对薄荷脑仅有薄层鉴别,尚无含量测定项目。为提高本品质量控制标准,本试验用气相色谱法对该药品中薄荷脑的定量分析方法进行研究。
        1 仪器与试药
        Agilent7890B气相色谱仪,FID检测器(Agilent公司);DB-WAX气相毛细管柱(Agilent,30cm×0.25mm×0.25mm)、电子天平(Sartorius,CP225D),电子分析天平(Sartorius,BSA224S)。
        薄荷脑对照品;萘、无水乙醇;清火片(基片重0.52g/片);高纯氮气。
        2 方法与结果
        2.1 色谱条件 DB-WAX毛细管柱,柱温:初始温度100℃,保持2min,再以10℃/分钟速率升温至180℃,保持20分钟;FID检测器,进样口温度220℃,检测器温度250℃。分流比为10:1。进样1µL。理论板数按薄荷脑峰计算不低于20000。
        2.2 内标溶液的配制 取萘适量,精密称定,加无水乙醇制成每1ml含1.75mg的溶液,作内标溶液。
        2.3 对照品溶液的配制 取薄荷脑对照品12.5mg,精密称定,置25ml量瓶中,精密加入内标溶液5ml,再加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀即得。
        2.4 供试品溶液的制备 取装量项下样粉末,取3.6g,精密称定,置25ml量瓶中,加入适量无水乙醇超声20分钟,精密加入内标溶液5ml,再加无水乙醇至刻度,摇匀,滤过即得。
        2.5 阴性样品溶液的制备 取缺薄荷脑阴性样品3.6g,精密称定,置25ml量瓶中,加适量的无水乙醇超声20分钟,精密加入内标溶液5ml,再加无水乙醇至刻度,摇匀,滤过即得。
        2.6 专属性试验 分别吸取内标溶液、对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各1µl,依本法测定,供试品与对照品在同一保留时间有相应的色谱峰对应,阴性样品溶液无干扰。
        2.7 线性关系考察 称取薄荷脑对照品75mg置50ml量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得薄荷脑对照品储备液。

分别取薄荷脑对照品储备液0.2ml,1.0ml,2.0ml,3.0ml,10ml置25ml,25ml,25,20ml,25ml制备线性关系对照品溶液1,2,3,4,5,各精密加入内标溶液5ml,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,进样1µL,按上述色谱条件测定。以浓度(mg/ml)为横坐标,对照品物峰面积为纵坐标,得线性方程Y=845.37X+25.006(r2=0.9964)。结果表明薄荷脑浓度在0.0121—0.6045mg/ml范围内线性良好。
        2.8 精密度试验 取同1份供试品溶液,在上述色谱条件下重复进样5次,以薄荷脑对照品峰面积与内标峰面积的比值计算。RSD为0.85%(n=5),精密度良好。
        2.9 稳定性试验 取同1份供试品溶液分别于0h、2h、6h、12h进行测定,按薄荷脑峰面积与内标峰面积之比计算,RSD为0.19%(n=4),表明本品的测定溶液在12h内稳定。
        2.10 重复性实验 取同批样品6份,制备成供试品溶液,在上述色谱条件下测定含量,结果6份样品中薄荷脑平均含量为0.3513mg/片,RSD为0.92%。
        2.11 加样回收率试验 取已知薄荷脑含量的样品100片,研细,混匀。称取6份,每份约1.8g,精密称定,置25ml量瓶中,分别精密加入薄荷脑对照品溶液储备液2.0ml,内标溶液5ml,按供试品溶液制备方法制备,在上述色谱条件下测定,并计算回收率,薄荷脑回收率为99.6%,RSD为1.72%。
        2.12 样品测定 取3批清火片样品,照上述方法测定,按内标法以峰面积计算样品中薄荷脑的含量,结果分别为0.3572mg/片、0.3492mg/片、0.3691mg/片,平均含量为0.36mg/片。
        3 讨论
        3.1 提取溶媒的选择 考察无水乙醇、正己烷、乙酸乙酯等溶剂对薄荷脑的溶解性,结果都有较好的溶解性且分离度和峰型都较好,选取无水乙醇为溶剂,低毒,安全。
        3.2 内标物的选择 测定薄荷脑用的内标物有萘、环己酮、水杨酸甲酯等。考察萘、环己酮、水杨酸甲酯作为内标物质和溶剂的溶解性及分离度,溶解性和分离度及峰型都较好,选择萘作为内标物质是因为它较其他两种物质为低毒性试剂。
        3.3 色谱柱的选择 分别比较了Agilent DB-WAX毛细管柱、中汇达 PEG-20M毛细管柱、Agilent HP-5毛细管柱检测,检测结果以Agilent DB-WAX毛细管柱最为理想,分离度最好。
        3.4 建立薄荷脑含量测定方法的意义 薄荷脑为清火片中有效成分,因其易挥发性的理化性质,在生产、储存与运输过程中均易引起其含量下降,从而影响制剂的疗效,故对清火片中薄荷脑制定含量测定指标是必要的,在能保证药品质量的同时,建议在生产过程中应开发清火片的薄膜包衣技术。

        参考文献
        1、中国药典2015年版一部,国家药典委员会,中国医药科技出版社;
        2、《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》第二册;
        3、国家食品药品监督管理总局国药药品标准WS3-B-0414-90-4;
        4、刘钰华,梁健钦,广州梧州市人民医院,气相色谱法测定清火片中薄荷脑的含量。
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